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专题2 微生物的培养与应用 微生物的定义 与微生物有关的知识 1.芽孢：有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。 2.菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做。 菌落是鉴定菌种的重要依据。 身边的微生物 专题2 微生物的培养与应用 一、微生物的营养方式及培养 自养型：硝化细菌等 水、无机盐 腐生型：枯草杆菌等 培养基 寄生型：肺炎双球菌等 活细胞 专题2 微生物的培养与应用 二、培养基的营养构成及类型 1.培养基的概念 2.营养构成 ①一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等 ②还需要满足不同微生物对PH、特殊营养物质及O2的要求。 3.类型 （1）按物理状态分 专题2 微生物的培养与应用 3.类型 （2）按功能分： 专题2 微生物的培养与应用 三、无菌技术 1.概念： 泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 成功地培养微生物的关键。 2. 概念 消毒 常用方法：煮沸消毒、巴式消毒、 化学药剂消毒、紫外线消毒 包括 概念： 灭菌 常用方法：烧灼灭菌 干热灭菌 高压蒸汽 专题2 微生物的培养与应用 四、基本操作技术 1.配制培养基 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板 2. 工具： 接种 方法： 3.培养：接种后的培养皿放入恒温箱中培养 专题2 微生物的培养与应用 五、分离与计数 1.土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 筛选方法：以尿素为唯一氮源的选择培养基 原 理：在上述培养基中加入酚红指示剂，若酚红指示剂 变红，可初步鉴定细菌能够分解尿素。 计数方法：显微镜直接计数、稀释涂布平板法 2.分解纤维素的微生物的分离 原 理：（1）纤维素→葡萄糖； （纤维素酶是一种复合酶） （2）纤维素可与刚果红形成红色复合物，纤维素被分解后红色消失，出现透明圈。 筛选方法：（1）选择培养基 2 鉴别培养基 5．分离土壤中分解尿素的细菌，对培养基的要求是 ①加尿素　②不加尿素　③加琼脂　④不加琼脂　⑤加葡萄糖　⑥不加葡萄糖　⑦加硝酸盐　⑧不加硝酸盐 A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦ 5．可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 A．以尿素为惟一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 B．以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂 C．以尿素为惟一氮源的培养基中加入苏丹Ⅲ试剂 D．以尿素为惟一氮源的培养基中加入双缩脲试剂 * 亲，你能够说出几种微生物？ 特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构.且体内一般不含有叶绿素.不能进行光合作用. 微生物包括哪五类： 病毒 细菌 放线菌 真菌 原生动物 原核生物界 原生生物界 真菌界 病毒界 ：是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称． SARS冠状病毒 禽流感病毒 真菌——灵芝 真菌——酵母菌 液体培养基 固体培养基 用途 特点 加凝固剂（如琼脂） 微生物的分离、 鉴定等 不加凝固剂 工业生产 鉴别培养基 选择培养基 用途 特点 培养基中加入某种化学物质，用来抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物生长。 培养和分离出特定微生物。 根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品 鉴别不同种类的微生物 思考： 下列属于哪种类型的培养基： 1.在分离酵母菌和霉菌的培养基上加入青霉素。 2.用伊红—美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌，若有，则菌落呈深紫色并带有金属光泽。 例：微生物的接种工具 例：玻璃器皿、吸管等 例：培养基及容器等 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？ 2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。 （1） 培养细菌用的培养基与培养皿 （2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管 （3） 实验操作者的双手 答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。 答：（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。 接种环、涂布器等 平板画线法： 稀释涂布平板法： 平板划线的操作方法 交叉划线法 连续划线法 1.在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？ 答：以免接种环温度太高，杀死菌种。 2.在作第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 答：划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 微生物的恒温培养 微生物的恒温培养 【典例解析】 例1．关微生物营养物质