第七章细菌和病毒的遗传分解.ppt

四. 转导 以噬菌体为媒介所进行的细菌遗传物质重组的过程。 转导现象的发现 1952年Zinder N.和Lederberg J. 鼠伤寒沙门氏菌 LA2 phe+ trp- met+×LA22 phe﹣ trp+met﹣ ↓混合培养 原养型菌落 10﹣5（不可能是回复突变） ？ 转化还是接合 ⑴ FA 过滤性因子 不因DNA酶而失活，说明是非裸露DNA ⑵ FA与从溶源性细菌分离得到的噬菌体P22质量大小相同 ⑶ 对P22的血清敏感，加热失活 ⑷ 抗噬菌体P22的沙门菌菌株对FA也表现抗性 FA是噬菌体P22 出现原养型菌落 表明不是接合 2. 普遍性转导（一般性转导） 2. 普遍性转导（一般性转导） 细菌染色体组中被转导的基因是随机的，转导的DNA片段大小约为一个噬菌体基因组的大小。 两个基因距离越近，并发转导的可能性越大 并发转导频率 X 1﹣d/L 3 d—两基因的距离（Kb L—最大可包裹DNA长度 Kb 2. 普遍性转导（一般性转导） 2. 局限性转导（特殊性转导） 转导的细菌基因仅限于某些特定的基因 1956年，Morse 和 Lederberg 以λ噬菌体为媒介做转导试验，转导仅限于gal和bio 区以内的基因 。 trp2+his2+tyr1+ （供体）×trp2-his2-tyr1-（受体）的转化类型及重组率计算 根据上表计算结果绘制的连锁图 1. 接合现象的发现 1946年 J.Leaderberg和E.Tatum E.Coli K-12 菌株A met- bio- thr+ leu+ thi+ 菌株B met+ bio+ thr- leu- thi- 二. 接合 单基因突变率 10 –6 回复突变 10-12 or 10-18 如何产生？ 原养型的出现 以A、B菌株直接接触为前提 隔离培养后 不出现原养型 2. F因子及其转移 1952年，W.Hayes A菌株 B菌株 链霉素 AB混合培养，原养型重组体 链霉素 BA混合培养 ， × 细菌接合中遗传物质转移单向过程 （即从A →B株） 细菌分为两个类群（两种接合型 供体（或雄菌株） 受体（或雌菌株） 2. F因子及其转移 致育因子（或F性因子，也叫F质粒） 染色体外的一个共价环状DNA分子 （94.5kb 细菌DNA的2% 1/3基因与结合有关 接合：原核生物中，遗传物质从供体（“雄性”）转移到受体（“雌性”）的过程。 2. F因子及其转移 据 F 因子有无以及存在状态 E.Coli 有三种类型： F﹣ 不含有 F 因子 F+ 含有一个自主状态的 F 因子 Hfr 高频重组菌株） 含有一个整合到染色体上的 F 因子 F + × F﹣ → F + Hfr菌株的染色体 Hfr×F﹣→ 多数为F﹣ 3. 中断杂交试验及染色体作图 1957年E.Wollman和E.Jacob设计 Hfr菌株 strs azir tonAr gal+ lac+ F﹣菌株 strr azis tonAs gal﹣ lac﹣ 链霉素 叠氮化物 T1噬菌体 半乳糖发酵 乳糖发酵 步骤: 供体受体混合培养 ↓ 隔时取样 ↓ 稀释搅拌，中断杂交 ↓ 在含链霉素的完全培养基上选重组子 ↓ 鉴定重组体基因型 ↓ 记录重组体频率及首次出现的时间 ↓ 分析作图 Hfr 基因转移顺序 HfrH 1 2 3 AB312 0 Thr Pro lac pur gal his gly thi 0 Thr Thi gly his gal pur lac pro 0 Pro Thr thi gly his gal pur lac 0 Pro Lac pro thr thi gly his gal 0 Thi Thr pro lac pur gal his gly 用中断杂交法确定的几个Hfr菌株的基因顺序 转移的基因邻里关系不变 Hfr 基因转移顺序 HfrH 1 2 3 AB312 0 Thr Pro lac pur gal his gly thi 0 Thr Thi gly his gal pur lac pro 0 Pro Thr thi gly his gal pur lac 0 Pro Lac pro thr thi gly his gal 0 Thi