第十八章高效液相色谱法分解.ppt

第十八章 高效液相色谱法high performance liquid chromatography；HPLC 秦汤（药学本科一班） 高效液相色谱法基础 1.HPLC的定义与其他色谱法的比较 2.HPLC的主要类型 3.HPLC的固定相 4.HPLC的流动相 5.正相键合相色谱法 6.反相键合相色谱法 7.反相离子对色谱法 8.其他高效液相色谱法 a.化学键合相的种类 b.化学键合相的性质 键合反应 目前使用的化学键合相主要为硅氧烷（Si-O-Si-C）型键合相，是以氯硅烷与硅胶进行硅烷化反应而制得。（ODS是以十八烷基氯硅烷与硅胶表面的硅醇基反应键合而成） 含碳量和覆盖度 键合相表面基团的键合量，可通过对键合硅胶进行元素分析，用含碳的百分数表示。（ODS的含碳量可以在5%-10%的范围） 基团的键合量可用表面覆盖度表示，即参加反应的硅醇基数目占硅胶表面硅醇基总数的比例。 为减少残余硅醇基，一般在键合反应后，要用三甲基氯硅烷等进行钝化处理，即封尾（end-capping），封尾后的ODS吸附性能降低，稳定性增加 1.使用硅胶基质的化学键合相时流动相中水相的pH应维持在2-8，否则会引起硅胶溶解，但硅-碳杂化硅胶等为基质的键合相可用于很宽的pH范围（如pH2-12） 2.不同厂家，不同批号的同一类型键合相也可能表现不同的色谱特性 c.其他种类的固定相 键合型离子交换剂