高蛋白海洋酵母的分子生物学鉴定--课稿.ppt

Page ? * 高蛋白海洋酵母的分子生物学鉴定 主要内容： 1、简介 2、 18S rRNA基因及ITS鉴定方法 3、鉴定结果 4、结论 * 简介 一、PCR 聚合酶链式反应（PCR），是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性、低温退火及适温延伸等几步反应组成一个周期,循环进行,使目的DNA得以迅速扩增,具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。 * 二、18S rRNA 及ITS序列 在 rDNA?基因中，5.8S rDNA 和 28S rDNA 基因间隔序列称为 ITS ，它的长度和序列变化较大，将其扩增物进行 RFLP（限制性内切酶片段长度多态性） 或序列分析，可用于对细菌的不同生物型、菌株、种、属进行分类鉴定。甚至用于区分关系非常近的种。 * 在真核生物中，核糖体DNA是由核糖体基因及与之相邻的间隔区组成,其基因组序列从5’到3’依次为：外部转录间隔区 external transcribed spacer,ETS 、18S基因、内部转录间隔区1 internal transcribed spacer , ITS1 、5. 8S基因、内部转录间隔区2 ITS2 、28S基因和基因间隔序列 intergenic spacer, IGS 。核糖体DNA中的18S、5. 8S和28S的基因组序列在大多数生物中趋于保守,在生物种间变化小,而