第十六章_细胞的破碎分解.pptVIP

③渗透压冲击法 渗透压冲击是较温和的一种破碎方法，将细胞放在高渗透压的溶液中（如一定浓度的甘油或蔗糖溶液），由于渗透压的作用，细胞内水分便向外渗出，细胞发生收缩，当达到平衡后，将介质快速稀释，或将细胞转入水或缓冲液中，由于渗透压的突然变化，胞外的水迅速渗入胞内，引起细胞快速膨胀而破裂(此法对革兰氏阳性细菌不适用)。 ④冻结-融化法 将细胞放在低温下冷冻（约-15℃），然后在室温中融化，反复多次而达到破壁作用。 一方面能使细胞膜的疏水键结构破裂，从而增加细胞的亲水性能，另一方面胞内水结晶，形成冰晶粒，引起细胞膨胀而破裂。对于细胞壁较脆弱的菌体，可采用此法。 ⑤干燥法 经干燥后的细胞，其细胞膜的渗透性发生变化，同时部分菌体会产生自溶，然后用丙酮、丁醇或缓冲液等溶剂处理时，胞内物质就会被抽提出来。 干燥的方法有空气干燥、真空干燥、冷冻干燥等。干燥法条件变化剧烈易引起蛋白质变性。提取不稳定生化物质时，常加某些试剂进行保护，如半胱氨酸、琉基乙醇和亚硫酸钠等还原剂。 冷冻干燥技术 广泛应用于药品、生物制品、化工及食品工业。对热 敏性物质如抗生素、疫苗、血液制品、酶激素及其他生物组织，冻干技术非常适用。 目标产物的选择性释放(总目标) 破碎的目的是要得到一种或几种目标产物，因此，在细胞内存在的许多种物质中，选择性释放目标产物、而使其它物质尽量少地释放出来，并且尽量降低细胞的破碎程度，