基因工程载体 3.2.pptVIP

第二章 基因工程载体 1. 基因工程载体的概念 T vector的克隆过程 2. 基因工程对载体的要求 3. 载体的种类 第一节 质粒载体 （4）质粒的空间构型： ② 开环DNA（ open circular， ocDNA） （5）质粒空间构型与电泳速率 二、质粒的类型 1. 接合型质粒： 大肠杆菌接合（conjunction） 2. 非接合型质粒： （2）Col质粒： 三、质粒载体的构建 第一阶段（1977年前）：天然质粒和重组质粒的利用，如pSC101, colE1, pCR, pBR313和pBR322。 第二阶段：增大载体容量(降低载体长度)，建立多克隆位点区和新的遗传标记基因,如pUC系列载体。 第三阶段：完善载体功能以满足基因工程克隆中的不同要求，如M13mp系列载体，含T3，T7，sp6启动子载体，表达型载体及各种探针型载体。 三、质粒载体的构建 用小写字母p代表质粒（plasmid），在p字母后用两个大写字母代表发现这一质粒的作者或实验室名称，再加上质粒编号。 如：pBR322：p表示一种质粒，而“BR”则是分别取自该质粒的两位主要构建者F. Bolivar和R. L. Rodriguez，322为编号。 三、质粒载体的构建 4. 质粒载体必须具备的基本条件 抗菌素选择原理 四、经典的大肠杆菌质粒载体 （4）克隆位