致病基因鉴定-2015-2016学年辩析.ppt

等臂染色体：ISO * 舞蹈样症状一般出现在智能障碍前。早期常为不规则的肌肉抽动，表现手指屈伸运动、点头、面肌抽动呈怪相。进一步发展为面、颈、肢体和躯干出现突然、无目的、强烈的不自主舞蹈样动作。其特点是快速无规律，突然的有时像手足徐动症一样缓慢而有节奏的运动。伴有发音不清与步态改变，也可以出现锥体外系症状，患者常用同方向的随意运动来伪饰。它属于一种肌张力减弱、运动功能增强的锥体外系综合征。异常运动日益增剧导致明显的扭转样动作与共济失调。舞蹈症状出现后智能障碍往往加重。 * 血红蛋白病：血红蛋白分子的珠蛋白肽链结构异常 地中海贫血：珠蛋白肽链合成速度降低，溶血性贫血 * * 乳仓鼠肾细胞（BHK) * 检查方法：令患者蹲位或卧位起立，患有骨盆带肌力弱的患者，自蹲位起立时常需用手支膝而后缓慢挺起腰部。随着肌肉力弱程度的加重可进一步表现为，先用手支扶小腿并逐渐上移至股部，将身体重力支于手臂，而后挺起腰部而直立；或先将腿分开，双手扶地，而后逐渐将下肢作为支撑点，逐渐抬起腰部，直至完全不能自蹲位起立。进行卧位检查时，患者先需侧转身体，而后取俯蹲位支床、扶膝才能挺直腰部。卧位检查应用于发病早期儿童的检查。意义：Gowers征阳性提示骨盆带肌、伸髋、伸膝肌群，特别是髂腰肌、臀部肌、股四头肌力弱，可用以诊断各类进行性肌营养不良及其他神经肌肉疾病。同时，Gowers征还用于描述坐骨神经压迫征时背伸拇趾在坐骨神经通路范围内出现的疼痛，以及脊髓痨早期瞳孔缩小这两类与骨盆带肌力弱毫无联系。 * 神经纤维瘤病Ⅰ型 (NF1)是一种常见的常染色体显性遗传病。 囊性纤维化是由CF基因引起的遗传病 * PAH基因:苯丙酮尿症 * DNA双链在转录过程中与转录形成的mRNA序列相同（mRNA中用U代替DNA中的T）的那条单链叫做有义链或正义链（sense strand）。 1961年，韦斯(Weiss)等发现离体系统的双链的DNA都可以作为模板，合成不同的RNA分子以后，马默(Marmur)在侵染枯草杆菌的噬菌体实验中发现，DNA分子两条链中只有一条具有转录功能。这条具有转录功能的链叫做模板链或反义链，另一条无转录功能的链叫做编码链或有义链。有义链的判定以基因为准，这个基因的有义链可能是另一个基因的反义链。 * * * 2、利用染色体畸变进行基因定位与分离 若发现某种疾病与染色体畸变直接相关，致病基因就可定位在一段相对较短的染色体变异区域。 通过连锁分析将基因分离的目标初步定位在10～20Mb区段内，使要分离的目标基因大大缩小，省去了大量繁琐的全基因组连锁分析，大大加快了该基因的定位和分离速度。 通过筛选DNA文库、外显子捕获(exon trapping)和比较基因组杂交(comparative genome hybrid izatien)等表型策略获得致病基因。 * * 3、cDNA选择法 基因组图谱绘制和基因定位克隆的常见问题是大片段基因组编码DNA的鉴定。为解决此问题，1991年，Parimoos 等首先提出了cDNA选择法。 此法采用cDNA片段与固定在膜上的DNA进行杂交，通过PCR回收候选cDNA。用YAC、粘粒克隆扩增cDNA，进行基因组DNA大片段编码序列的迅速克隆。 * * 4、CpG岛法 CpG岛(CpG island)是基因组DNA序列中富含C-G的DNA区域。 在大规模的DNA测序中，每发现一个CG岛，意味着在此有一个基因。 利用CpG岛稀有酶如SacⅡ、BssH Ⅲ、EagⅠ、HpaⅡ、NotⅠ识别其位点，切割基因组DNA。CpG岛又称HIF岛，即用HpaⅡ酶将CpG岛周围的DNA切成许多小片段，这些序列称为HIF序列。 用位于CpG附近的序列作探针，从总DNA文库或cDNA文库中得到转录子，鉴定表达基因。 * * CpG island * * CPG预测及引物设计 * * 5、基因表达序列分析(Serial analysis of gene expression,SAGE) Velcule scu VE 等(1995)率先提出的一种分析基因表达的新策略，其主要特点是能在短期内采用PCR或手动测序等通用仪器得到大量的表达信息，并能对不同状态下的表达基因进行定量和定性的检测，比较完整地直接读出基因表达的信息。 因此，SAGE技术在研究表达基因测序上有较大的发展潜力。与cDNA选择法相比，基因序列表达分析能减少大量的重复测序，大大节省研究时间和费用。 * * 6、动物基因组印迹杂交 动物基因组印迹杂交(Zoo blot)是基于人类及其他动物在长期进化中普遍存在基因的同源和保守序列的理论设计的。 该方法采用同一基因单拷贝的分子探针与各种动物的基因组DNA作Southe