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专题一 微生物利用及生物技术在食品加工中的应用 考点一 微生物的培养与应用 1. 2010·山东,34 生物柴油是一种可再生的清洁能源,其应用在一定程度上能够减缓人类对化学燃烧的消耗。科学家发现,在微生物M产生的脂肪酶作用下,植物油与甲醇反应能够合成生物柴油 如图 。 1 用于生产生物柴油的植物油不易挥发,宜选用________、________方法从油料作物中提取。 2 筛选产脂肪酶的微生物M时,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供________,培养基灭菌采用的最适方法是________法。 3 测定培养液中微生物数量,可选用________法直接计数;从微生物M分离提取的脂肪酶通常需要检测________,以确定其应用价值;为降低生物柴油生产成本,可利用________技术使脂肪酶能够重复使用。 4 若需克隆脂肪酶基因,可应用耐热DNA聚合酶催化的________技术。 解析 1 因为植物油不易挥发,不能选用蒸馏法提取,可以用压榨法、萃取法从油料作物中提取。 2 微生物的生长需要水、碳源、氮源和无机盐等,选择培养基中添加的植物油为微生物生长提供碳源。培养基灭菌采用的最适方法是高压蒸汽灭菌法。 3 测定培养液中微生物的数量,可选用显微镜直接计数法直接计数。提取的脂肪酶在应用于实验或生产之前,要先检测其活性,以确定其应用价值。固定化酶技术可以实现酶的反复利用,降低了生产成本。 4 在应用PCR技术扩增DNA片段时,DNA合成 延伸 时温度要控制在72℃,需要具有较强的耐热性的DNA聚合酶催化。 答案 1 压榨 萃取 2 碳源 高压蒸汽灭菌 3 显微镜直接计数 酶活性 或:酶活力 固定化酶 或:固定化细胞 4 PCR 或:多聚酶链式反应,聚合酶链式反应 2. 2014·全国课标Ⅰ,39 植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题。 1 分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将________分解成________。 2 在含纤维素的培养基中加入刚果红 CR 时,CR可与纤维素形成________色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时,培养基上会出现以该菌的菌落为中心的________。 3 为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两种培养基 成分见下表 : 注:“+”表示有,“-”表示无。 据表判断,培养基甲________ 填“能”或“不能” 用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是____________________;培养基乙________ 填“能”或“不能” 用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是___________________________________________。 答案 1 纤维二糖 葡萄糖 2 红 透明圈 3 不能 液体培养基不能用于分离单菌落 不能 培养基中没有纤维素,不会形成CR-纤维素红色复合物,即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌 1.微生物培养中的无菌操作技术 1 常用消毒3种方法—— 消毒法、巴氏消毒法及化学药剂消毒法。 2 常用灭菌3种方法 灭菌——接种环、接种针等金属器具;干热灭菌——主要针对玻璃器皿等; 灭菌——主要针对 等。 2.培养基制备与微生物纯化技术 3.常考微生物培养与分离中的“对照组”与“重复组” 1 确认培养基制备是否合格——设置未接种的培养基与接种培养基一起培养,若未接种培养基上无菌落生长,表明培养基制备合格。 2 确认选择培养基的“筛选”作用——设置接种的普通培养基,与接种的选择培养基一起培养,若选择培养基中生长的菌落种类与数量明显少于普通培养基组别,则可表明选择培养基已起到了筛选作用。 3 为增强实验的说服力和准确性,则需设置重复组,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。 再悟高考 1.判断正误 1 某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理。接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养。 2013·江苏卷,T18C 2 在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长。 2011·重庆卷,T2B 3 纯化菌种时,为了得到单菌落,常采用的接种方法有两种,即平板划线法和稀释涂布平板法。 2011·新课标全国卷,T39 2 4 在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌。 2011·重庆卷,T2A 5 检测土壤中细菌总数实验操作中,确定对照组无菌后,选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数。 安徽卷,T6D 2. 2014·四川卷,10 有机农药苯磺隆是一种除草剂,长期使用会污染环境。研究发现,苯磺隆能被土壤中某些微生物降解。分离降解苯磺隆的菌株和探索其降解机制的实验过程如图甲、乙所示
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