抗gremlin1单克隆抗体的制备和初步鉴定——一种有望成为检测子宫内膜异位症的新标记物.pfg.docVIP

目录 缩略语表………………………………………………………．３ 中文摘要…………………………………………………………．．４ Ａ ＢＳＴＲＡＣＴ……．．…………………．………………………………．．４ 引言………………………………………………………………………．６  第１章  抗ＧＲＥＭＬＩＮ １单克隆抗体的制备…………８  ｌ ｌ ｌ ｌ ｌ  材料…………。 标准品和化学试剂……………………………………………………………………………８ ｌ ｌ ｌ ｌ ２ ３ 实验动物及细胞株……………………………………………………………………………９ 实验溶液………………………………………………………………………………………９ ｌ ２ ３ 主要实验仪器………。 实验方法 １２ １３ ３ ｌ ３ ２ ３ ３ 制备免疫原…………………………………………………………………………………一１３ 动物免疫……………………………………………………………………………………。ｌ ３ 血清效价测定………………………………………………………………………………～１４  ｌ：ｉ ｌ ３ ４ ３ ５ ３ ６ ３ ７ 细胞融合………………………………………………………………………………………．１ ４ 阳性细胞株筛选和克降化…………………………………………………………………。１６ 细胞株的冻存与复苏………………………………………………………………………一１７ 单兜隆抗体的制备及纯化…………………………………………………………………．．１７ ｌ ４ 结果分析……………………………………………………………． …１８ １ ４ ｌ 血清效价测定…………………………………………………………………………………ｌ ８ １ ４ ２ ｌ ５ 杂交瘤细胞…………………………………………………………………………………．．１ ９ 讨论………………………………………………………………………．  ｉ ｌ ５ １ ５ ２ ５ ３ ６ 单克隆抗体的优势…………………………………………………………………………．．２０ 两种标准品作为免疫原的比较……………………………………………………………一２１ 抗舒ｅｍｌｉｎ ｌ荦航的临昧应川………………………………………………………………２２ 结论  第２章  抗ＧＲＥＭＬＩＮ １单克隆抗体的初步鉴定……．２４  ２．１  材料…………．  ２４ ２，１．１ ２．１．２ 符奉及纪≠况蒯…………………………………………………………………．．２彳 实验溶液……………………………………………………………………………………．．２５ ２．２ ２．３ 主要实验仪器 实验方法………………………． ２７ ２７ ２．３．１ 单克隆抗体浓度的测定……………………………………………………………………一２７ １ ２．３．２ ２．３．３ ２．３．４ ２．４ ２．４．１ ２．４．２ ２．４．３ ２．４．４ ２．５ ２．５．１ ２．５．２ ２．５．３ ２．５．４ ２．６  单克隆抗体效价的测定……………………………………………………………………．．２８ 细胞免疫荧光法鉴定单抗特异性…………………………………………………………一２８ Ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔｔｉｎｇ………………………………………………………………………………………………………．．２９ 结果匀……………………………………………………………………………………………………………３０ 腹水单抗浓度测定…………………………………………………………………………．．３０ 腹水单抗效价测定…………………………………………………………………………．．３０ 细胞免疫荧光鉴定单抗特异性……………………………………………………………。３１ ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｔｔｉｎｇ鉴定Ｉ社抗特片性…………………………………………………………．３３ 讨论…………………………………………………………………………………………………………………．．３３ 腹水单抗浓度………………………………………………………………………………．．３３ 腹水单抗效价………………………………………………………………………………～３４ 细胞免疫荧光法及ｗｅｓｔｅｍ ｂｌｏｎｉｎｇ法鉴定单抗的结合特性和特异性…………………。３４ 寻找ＥＭｓ生物标记物的意义和进展………………………………………………………３５ 结论………………………………………………．………………………．．…………………………………………．．３６  综述…………………………………