用于末端烯烃生产的酿酒酵母组合代谢工程优化答题.ppt

用于末端烯烃生产的酿酒酵母组合代谢工程优化 汇报人：XXX 学号：座机电话号码XXX 班级：硕士X班 武汉青山区石油化工厂生产废气 研究背景 天大研发大规模生物乙烯工厂 减少石油生产燃料，使用可再生的低碳方法生产燃料迫在眉睫 研究背景 生产洗涤剂、润滑液 高内能 兼容的碳氢化合物燃料添加剂 兼容现有发动机平台 应用层面不断扩大 市场需求巨大，现有生产方法污染大 经济和环境层面上，生物烯烃的代谢工程方法开发具有很高的需求 试验思路 利用酿酒酵母来构建一种一步脂肪酸脱羧途径来生产末端烯烃，并利用组合工程策略来提高烯烃的产量 A 试验方法及结果讨论 I.筛选在酵母中进行烯烃生物合成的酶 使用来自于Jeotgalicoccus sp的细胞色素脂肪酸脱羧酶oleTJE 用作脂肪酸脱羧基转化为末端烯烃 Rude et al., 2011 从它的密码子优化版本oleTJE-CO和它的六个同源基因中进行筛选 将这些基因克隆进高拷贝质粒pESC-URA，然后转化进入酿酒酵母 诱导蛋白表达由使用抗6×多聚组氨酸标签抗体 HRP 的蛋白质印记方法确认 细胞培养生长48小时后定量分析比较烯烃的产量，定性分析烯烃的种类评估上述不同酶的表现 试验方法及结果讨论 I.筛选在酵母中进行烯烃生物合成的酶 使用酵母细胞组合oleTJE同源染色体进行烯烃的生产。oleTJE-CO、oleTSM、oleTMC、oleT