09细胞骨架探究.ppt

成分：微丝、微管、中间纤维。单体蛋白以非共价键结合，构成纤维型多聚体。 微丝确定细胞表面特征，使细胞运动和收缩。 微管确定细胞器位置和作为膜泡运输的导轨。 中间纤维使细胞具有张力和抗剪切力。 其它骨架成分：核骨架、核纤层、膜骨架、细胞外基质。 第一节 微丝 microfilament , MF 又称actin filament，是两条肌动蛋白链形成的螺旋，直径7nm 。 一、结构 按等电点分3类：α-actin分布于肌细胞；β和γ分布于各类细胞。 单体呈哑铃形，称G-actin；多聚体称F-actin。 结构保守，酵母和兔actin有88%的同源性。 二、装配 条件：ATP、适宜温度、K+和Mg2+。 过程：2-3个actin聚集成核心（核化）；ATP-actin分子向核心两端加合。 具有极性，ATP-actin加到+极的速度快于-极5-10倍，临界状态下、可在+端添加，而在-端分离，称为 “踏车”现象。 在体内微丝处于动态的组装状态。 细胞松弛素可切断微丝纤维，并结合在微丝末端抑制actin加合到微丝纤维上。 鬼笔环肽使纤维稳定而抑制其功能。荧光标记的鬼笔环肽可特异性的显示微丝。 三 、微丝结合蛋白 已知100多种。 功能：促进组装、去组装、使纤维交联、形成蛋白库等。 类别：核化蛋白、单体隐蔽蛋白、封端蛋白、单体聚合蛋白、微丝解聚蛋白 、交联蛋白、纤维切断蛋白、膜结合蛋白。 Actin associated proteins 三、肌肉的组成 肌小节是肌肉收缩的基本单位。指相邻两Z线间的单位。主要结构有： A带（暗带）：粗肌丝所在。 H区：A带中央色浅部份，此处只有粗肌丝。 I带（明带）：只含细肌丝部分。 Z线：细肌丝一端游离，一端附于Z线 。 Sarcomere （一）肌球蛋白（myosin） 属于马达蛋白，多数趋向微丝的+极。 已知至少24类（myosin I-XXIV）。 Myosin II构成粗肌丝。由2个重链和4个轻链组成，重链分为头、颈、尾三部分，头部有ATP酶活性。 Myosin II structure Two heavy chains, two essential light chains, and two regulatory light chains Heavy chain has head domain, neck region, and tail domain （二）原肌球蛋白 每个Tm长度相当于7个肌动蛋白，呈长杆状。组成两条平行纤维，位于肌动蛋白双螺旋的沟中，主要作用是加强和稳定肌动蛋白丝，抑制肌动蛋白与肌球蛋白结合。 （三）肌钙蛋白 Troponin（Tn）含三个亚基； TnC特异地与钙结合； TnT与原肌球蛋白有高度亲和力； TnI抑制肌球蛋白的ATP酶活性，主要作用是调节肌肉收缩。 （四）肌肉的收缩 ①Myosin结合ATP，头部与actin分离； ②ATP水解，头部与actin弱结合； Myosin movement continued ③Pi释放，头部与actin强结合，弯曲，使actin向M线移动； ④释放ADP,结合ATP,头部与actin分离。 如此循环 四、微丝的其它功能 1．形成应力纤维：使细胞具有抗剪切力。 培养的上皮细胞中的应力纤维（微丝红色、微管绿色） 2．形成微绒毛。 3．形成细胞变形运动。 4. 参与胞质分裂； 5. 顶体反应（海胆 ）； 6. 形成胞质环流。 第二节 微管 Microtubule, MT 由微管蛋白组成的管状结构，对低温、高压和秋水仙素敏感。是胞内运输的路轨并起支撑作用。 一、结构 13条原纤维构成，直径22~25nm。 原纤维由微管蛋白二聚体线性排列而成。 二聚体由结构相似的α和β球蛋白构成，均可结合GTP。 α球蛋白结合的GTP从不发生水解或交换。而β球蛋白也属于G蛋白。 二、特性 具有极性， -极在中心粒，+极指向质膜； +极的最外端是β，-极最外端是α球蛋白； 具有踏车行为； 多数微管通过动态组装/去组装实现功能； 秋水仙素、长春花碱、紫杉酚可破坏微管功能。 The function of GTP-tubulin cap Antimitosis drugs 三、微管组织中心 是微管组装的区域，具有γ微管球蛋白，如：中心体、鞭毛基体。 中心体由两个相互垂直的中心粒构成。周围是无定形物质，叫称外中心粒物质（PCM）。 四、微管的组装 在体内：MTOC处微管蛋白以γ球蛋白复合体为模板核化、组装出-极，然后延长。 在体外：微酸性环境，适宜的温度，存在GTP、Mg2+和去除Ca2+的条件下，微管蛋白能自发组装成11条原纤维的微管。 五、微管结合蛋白 主要功能： ①促进微管组装； ②增加微管稳定性； ③促进微管聚集成束。 六