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专题1 ? 基因工程
基因工程的概念
基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过 ,赋予生物以 ,创造出 。基因工程是在 上进行设计和施工的,又叫做 。
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”—— ( )
(1)来源:主要是从 中分离纯化出来的。
(2)功能:能够识别双链DNA分子的某种 的核苷酸序列,并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开,因此具有 。
(3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:
和
2.“分子缝合针”——
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较:
①相同点:都缝合 。
②区别:E·coliDNA连接酶来源于 ,只能将双链DNA片段互补的 之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合 ,但连接平末端的之间的效率较 。
(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端,形成磷酸二酯键。
3.“分子运输车”——
(1)载体具备的条件:①
②
③
(2)最常用的载体是 ,它是一种
(3)其它载体:
(二)基因工程的基本操作程序
第一步:
1.目的基因是指: 。
2.原核基因采取 获得,真核基因是 。人工合成目的基因的常用方法有 _和 _。
3.PCR技术扩增目的基因
(1)原理: (2)过程:第一步:加热至90~95℃ ;第二步:冷却到55~60℃, ;第三步:加热至
70~75℃,
第二步:
1.目的:使目的基因在受体细胞中 ,并且可以 ,使目的基因能够 。
2.组成: + + +
(1)启动子:是一段有特殊结构的 ,位于基因的 ,是 识别和结合的部位,能驱动基因 ,最终获得所需的 。
(2)终止子:也是一段有特殊结构的 ,位于基因的 。
(3)标记基因的作用:是为了鉴定受体细胞中 ,从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。
第三步: _
1.转化的概念:
2.常用的转化方法:
将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 ,其次还有 和 等。
将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 。此方法的受体细胞多是 。
将目的基因导入微生物细胞:原核生物作为受体细胞的原
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