4 细菌检查与防治课件.pptVIP

细菌感染的实验室诊断与防治原则 标本的采集与运送 形态学检查 显微镜放大法 光学显微镜；电镜；暗视野显微镜； 荧光显微镜；激光共聚焦显微镜··· 染色法 单染色法： 复染色法：鉴别染色—革兰染色 抗酸染色 特殊染色 分离培养与鉴定 免疫学 抗原 检查 核酸检测 血清学诊断 用已知抗原检测病人血清抗体及效价 双份血清，≧4倍可确认 人工免疫：人为地给机体输入抗原物质使机体发生免疫应答，或直接输入特异性抗体或免疫细胞等，使机体获得特异性免疫的方法。 人工主动免疫（预防接种） 概念：用人工的方法给机体输入疫苗或类毒素等抗原物质，刺激机体产生免疫应答获得免疫力的方法。 抗原物质：疫苗（Vaccine）; 类毒素. 疫苗（Vaccine） 用细菌、螺旋体制成的生物制品（菌苗）或病毒、立克次体制成 的生物制品（疫苗）。 死疫苗：选用免疫原性好的标准微生物人工培 养后，用物理或化学方法杀死或灭活 后制成的生物制品。如伤寒、霍乱、 百日咳、流脑等疫苗 活疫苗：选用减毒或无毒的病原微生物制成的 生物制品。如卡介苗（BCG）、鼠疫、 炭疽等减毒活疫苗 亚单位疫苗：提取病原体有效的免疫原成分制成的疫苗。 如流感、霍乱亚单位疫苗 合成肽疫苗：用人工合成免疫原性多肽，与适当载体连接候的疫苗。 如细菌毒素多肽疫苗 基因工程疫苗：用基因工程的技术将编码病原体免疫原的基因与载体连接，并到使之在另一生物体表达病原体抗原，所制成的疫苗。如HbsAg疫苗 DNA重组疫苗：将编码病原体免疫原的基因与细菌质粒构建重组体称为DNA疫苗，可直接免疫机体。 类毒素：细菌的外毒素经甲醛处理后，失去毒性，仍保留其免疫原性。如白喉、破伤风类毒素 人工被动免疫 概念：用人工的方法给机体输入含有特异性抗 体的免疫血清，使机体立即产生免疫应 答获得免疫力的方法。 免疫血清种类： 1）抗毒素 2）人免疫球蛋白制剂（丙球、胎球） 3）细胞因子制剂 ，单抗等 * * 第一节 细菌感染的实验室诊断 第二节 细菌感染的防治原则 一、标本采集与送检 二、形态学检查 三、细菌的分离培养与鉴定 四、抗原、核酸检测 五、血清学诊断 第一节 细菌感染的实验室诊断 选择合适的采集部位； 早期； 用药前； 无菌操作； 快速送检 标本 分离培养 生化反应鉴定 形态学检查 血清学鉴定 动物试验 药敏试验 观察菌落 鉴定 培养基：将细菌生长繁殖所需的各种营养物质按比例配制而成的制剂。 常用培养基种类 液体培养基 + 1.5-2.5%琼脂 固体培养基 + 0.3-0.5%琼脂 半固体培养基 按物理性状分：液体、半固体、固体 按用途分： 厌氧培养基 基础培养基 营养培养基 选择培养基 鉴别培养基 SS 细菌的生长现象 固体培养基中： 菌落（S型） 菌苔 菌落（R型） 菌落与菌苔 液体培养基中： 沉淀生长 混浊生长 菌膜生长 沉淀、混浊、菌膜 半固体体培养基中： 混浊生长 沿穿刺线生长 有鞭毛细菌 无鞭毛细菌 沿穿刺线生长 混浊生长 常见的生化反应 对 糖 的 分解 对 蛋白质的分解 甲基红试验 单糖发酵试验 VP试验 吲哚试验 硫化氢试验 其他试验 枸橼酸盐利用试验 尿素酶试验 药敏试验（纸片法）根据纸片周围抑菌环大小决定药敏程度。 血清学鉴定:用已知的抗体与未知的细 菌做薄片凝集试验. 已知Ab+未知Ag 采集标本或培养物 ELISA、IF、RIA、 Western blot等 PCR、分子杂交、基因芯片（gene chips）等 分为：人工主动免疫；人工被动免疫 第二节 细菌感染的防治原则 疫苗的基本要求：安全性；有效性；实用性 Why do they not want to play with my kids? They should be vaccinated first