蟾蜍骨骼肌兴奋与收缩实验.docVIP

实验报告 课程名称： 生理科学实验 指导老师：虞燕琴 成绩： 实验名称蟾蜍骨骼肌兴奋与收缩实验同组学生： 一、实验目的和要求（必填） 二、实验内容和原理（必填） 三、主要仪器设备（必填） 四、操作方法和实验步骤 五、实验数据记录和处理 六、实验结果与分析（必填） 本人Email： 蟾蜍骨骼肌兴奋与收缩实验 （浙江大学医学院 级临床医学七年制生理科学实验 班 组，浙江 杭州 310058） [摘 要] 目的：学习RM6240多道生理信号采集处理系统和换能器的使用。学习蟾蜍坐骨神经—腓肠肌标本制备方法。观察不同刺激强度频率对肌肉收缩的影响。观察神经肌接头兴奋传递和骨骼肌兴奋的电变化与收缩之间的时间关系及其各自特点。方法：在保持刺激时间恒定的条件下，逐步增加对蟾蜍坐骨神经的刺激强度和改变电脉冲刺激频率，利用RM6240观察记录腓肠肌收缩张力变化。结论：当波宽为0.1ms的单刺激时，阈刺激时，肌肉收缩力1.437±0.828g，最大刺激时，肌肉收缩力11.162±5.797g，两者有显著性差异（p0.01），两者间肌肉收缩力随着刺激强度的增加而增大；在最大刺激作用下，不完全强直收缩临界频率为5Hz，肌肉收缩力为18.44±11.97g，完全强直收缩临界频率为20.7±4.9Hz，肌肉收缩张力为74.82±40.91g，后者肌肉收缩张力明显高于前者，两者有显著性差异（p0.01），两者间肌肉收缩力随着刺激频率的增加而增大。不同的刺激强度和频率对蟾蜍坐骨神经腓肠肌有不同的影响，在一定范围内，具有递增关系。 [关键词] 腓肠肌；单收缩；完全强直性收缩；不完全强直性收缩；阈刺激 1 材料和方法 1.1 材料 1.1.1 实验动物：蟾蜍。 1.1.2 药品与试剂：任氏液(Ringer`s solution)。 1.1.3 仪器：RM6240生物信号处理系统、神经肌肉标本盒（nerve-muscle chamber )、张力换能器、锌铜弓、玻璃分针、镊子、剪刀、蛙板。 1.2 方法 1.2.1坐骨神经腓肠肌标本制备：蟾蜍毁脑脊髓，去上肢和内脏，下肢剥皮浸于任氏液中。将蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上，用剪刀从脊柱正中剪开分成两个下肢标本，用玻璃分针分离脊柱傍的坐骨神经，用线在近脊柱处结扎，剪断神经，从大腿至腘窝分离坐骨神经。去除股骨上的肌肉，距膝关节1cm剪断股骨，分离腓肠肌跟腱穿线结扎，剪断跟腱，游离腓肠肌，在膝关节处剪去小腿。 1.2.2仪器连接和参数设置：固定股骨，坐骨神经搭于电极上。连接腓肠肌的张力换能器接第1通道，神经肌肉标本盒1对刺激电极接刺激输出通道，1对神经信号记录电极接第2通道。将腓肠肌跟腱的扎线固定在张力换能器悬臂梁上，不宜太紧，此连线应与桌面垂直，调节微距调节器，将前负荷调至2g。在“实验”菜单中选择生理科学实验中的“骨骼肌收缩”进入实验状态。参数：通道时间常数直流，灵敏度10-30g，滤波频率100Hz、 采样频率400-1KHz，扫描速度1s/div。刺激通道选单刺激模式，强度0.1~2V，波宽0.1ms，延迟1ms。 1.3 统计处理：对各次的收缩强度、收缩张力和频率等数据数据进行t检验，以p0.01表示差异有统计学意义。 2 观察项目 2.1不同刺激强度刺激坐骨神经对肌肉收缩张力的影响：从0.1V逐渐增大刺激强度，找出刚能引起肌肉出现微小收缩的刺激强度，即阈刺激强度。继续增强刺激强度，观察肌肉收缩反应是否相应增大。继续增强刺激强度，直至肌肉收缩曲线不能继续升高为止,这时的刺激强度即最大刺激强度。 2.2最大刺激强度时，不同刺激频率刺激坐骨神经对骨骼肌收缩张力的影响：用最大刺激强度，使刺激频率逐渐增加，记录不同频率时的肌肉收缩曲线，观察不同频率时的肌肉收缩变化。 2.3同步记录神经干动作电位、骨骼肌动作电位和肌肉收缩曲线。最大刺激强度下采用双刺激模式，波间隔分别为0.1,0.5,2,10,100,1000ms。 3. 实验结果 3.1记录阈刺激和最大刺激 对波宽为0.1ms的单刺激，阈刺激产生的肌肉收缩力1.437±0.828g显著小于最大刺激产生的肌肉收缩力11.162±5.797g（p0.01），阈刺激时刺激强度为0.540±0.211V，明显小于最大刺激时刺激强度0.999±0.409V，差异有统计学意义（p0.01）。在阈刺激和最大刺激之间，肌肉的收缩力随着刺激强度的增加而增加，当达到最大刺激后不再增加。见表1 图1 表1. 刺激坐骨神经引起蟾蜍腓肠肌收缩的阈刺激和最大刺激 阈刺激 最大刺激 样本 强度（V） 收缩张力（g） 强度（V） 收缩张力（g） 1 0.400 1.800 0.700 10.490 2 0.6