液相色谱—质谱联用.docxVIP

液相色谱—质谱联用来进行物质分离的实验 实验目的 了解液相色谱—质谱联用的基本原理； 掌握液相色谱—质谱联用时的操作步骤及实验方法； 学习分析色谱图和质谱图。 实验原理 利用不同的物质在固定相和流动相中具有不同的分配系数，当两相作相对位移时，使这些物质在两相间进行反复多次分配，使得原来微小的分配差异产生明显的分离效果，从而依先后次序流出色谱柱，以此来达到分离多种物质的目的。然后依次流出的物质进入质谱中被打碎成为各种离子而被检测到。以此达到分离的目的。 实验仪器和材料 高效液相色谱仪及质谱仪（见下图）、甲醇、水、TADB（相对分子量516）、TAIW（相对分子量336）、色谱柱 实验步骤 将待分离的两种物质的混合物配成溶液加入到2号样瓶中去； 启动联机软件，在四元泵模块的空白处右键单击，在弹出的“方法”选项中编辑好流动相和流速，点击确定，以使体系过渡到目标状态，直到压力稳定为止； 进入“方法”菜单，“编辑完整方法菜单”，按照“方法参考”进行编辑（“方法参考”中的参数编辑完成后继续进行编辑，编辑质谱的相关参数：选择正负极及电压等），编辑完成后再次进入“方法菜单”，选择“方法另存为”命名后点击“确定”进入“序列”菜单，“序列表菜单”，然后编辑样品瓶位置为1号、样品名称、使用方法、进样次数、数据文件、进样量，确定后再次进入“序列菜单”的“序列参数”菜单，再选择文件夹，确定； 方法编辑完成且压力稳定后，点击进样器左上方的“序列/开始序列”按钮，进行测试，等待测试完毕，点击停止按钮。然后进入“脱机”软件，查看积分测试报告。 实验结果及分析 实验时的液相色谱条件统一为：70%的甲醇，流速0.4ml/min，进样量1ul，波长230nm，测试时间15min。在正极性条件下： 在负极性情况下： 由图中信息可以看出有337、359、和517、539这些峰，正好比TAIW（336）和TADB（516）的分子量多1、23，也就是多加了一个氢离子和钠离子，符合实验预测，可以证明实验所测物质就是TAIW和TADB，实验达到了分离的目的。 实验注意事项 严格按照实验步骤进行操作，谨防错误操作弄坏仪器； 根据所测物质的不同选择正确的极性。