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清肝注射液与茵陈的相关性研究 　　【摘 要】目的：对清肝注射液与茵陈进行相关性研究。方法：采用水蒸气蒸馏法分别从清肝注射液和茵陈中提取挥发油，应用GC-MS联用检测仪对提取的挥发油进行成分分析。结果：清肝注射液中的23个主要成分中除4号和21号峰外，其余均来源于茵陈药材。结论：应用GC-MS法分离、分析挥发油成分，操作快速、简便，为中药复方清肝注射液的物质组成和质量控制的基础研究提供一种快捷的比较方法。 　　【关键词】清肝注射液；茵陈；挥发油；GC-MS 　　清肝注射液具有清热利湿、利胆迟黄之功效，在临床上已得到广泛应用。清肝注射液是板蓝根和甘草、茵陈按10：1：5的比例组成的复方（其中非挥发性成分是来自板蓝根和甘草，挥发性成分是来自茵陈），根据其生产工艺可知，清肝注射液中挥发性成分主要来自茵陈药材。茵陈（Herba Artemisiae Scopariae）为传统中药，临床上广泛用于治疗黄疽、肝炎等疾病，其挥发油具有广谱抗菌和杀菌作用。 　　复方中的成分是单味药的简单加和，还是有新的组分生成，不能仅从色谱保留时间来判断，因为不同的中药，组成的物质群不同，即使色谱条件完全相同，其中相同的组分其色谱保留时间也会不同，可能有以下几种原因：第一，中药成分复杂，即使完全相同的组分，在不同的物质群中，由于组分之间的相互作用、组分与固定相之间的相互作用以及组分的浓度不同，导致色谱保留时间漂移；第二，由于仪器的系统误差及一些不可控实验因素的影响，导致色谱漂移。 　　1.仪器与试剂 　　GC-2010A型气相色谱仪，GCMS-QP2010型气相色谱质谱联用仪（日本岛津公司）；挥发油提取器。 　　清肝注射液和茵陈药材均由江西省天施康中药股份有限公司提供；正己烷为分析纯，水为蒸馏水。 　　2.方法 　　2.1色谱条件 　　OV-1弹性石英毛细管柱30m×0.25mm×0.25um，进样口温度250℃，载气为N2，流速0.70ml.min-1，分流比5：1，程序升温起始温度为60℃ （保持5min），然后以4℃?min-1的速度升温至240 ℃（保持5min），进样量1?l。 　　质谱条件：电离方式：EI源；电子能量：0.75kv；离子源温度：200℃；质量范围（m/z）：30-400amu；扫描间隔：0.2s/scan。 　　2.2供试品溶液的制备 　　量取注射液50ml（或称取药材12.5g），置于圆底烧瓶中，加玻璃珠数粒，连接挥发油提取器。挥发油提取器的收集管中上端加水，使充满刻度部分，再加正己烷1mL，连接回流冷凝管，适当温控提取。从回流开始计时，控制温度使每分钟约20滴。60min后停止加热，冷却，收集含有挥发油组分的正己烷溶液。用正己烷定容至2ml，即得。所用药材的量与注射液的浓度一致。 　　3.结果与讨论 　　3.1茵陈药材与注射液中挥发性成分定性、定量分析 　　采用GC/MS联用技术，对茵陈药材和清肝注射液中的挥发性成分进行分析，分别分离出28个和23个主要成分。将所得各成分的质谱图，直接用该机的数据系统进行检索（谱库NIST107），并用标准图谱比较，确定其成分。用岛津公司GC/MS工作站中的峰面积归一化法，测定各成分的相对百分含量。定性、定量结果见表1。 　　3.2茵陈药材与注射液中挥发性成分的相关性分析 　　图1为茵陈药材和清肝注射液中挥发性成分的总离子流图（TLC），它们均是很复杂的分析体系， 大部分色谱峰都达到基线分离， 但也有些色谱峰出现重叠现象。对于已得到定性结果的谱峰，根据二者的色谱保留时间以及定性分析结果可以确定其相关关系及归属问题。对于匹配率较低的谱峰，如注射液中的15号、17号和18号峰，我们采用光谱相关色谱的方法来确定它们的对应关系。 　　在相关色谱分析前，首先要得到各谱峰的纯质谱。17号和18号峰均为纯峰，各色谱流出点对应的质谱图均相同。因此，任取其中的一点对应的质谱即可得到其纯质谱。由于15号峰不纯，首先要确定纯物质区域，这可以通过二维数据解析获得。其纯物质区域各点对应的质谱为纯质谱。在实际计算中，为了避免噪声和计算误差等的影响，我们一般选取色谱响应值最高的点附近的一段区域，进行重复计算得到光谱相关色谱。 　　如注射液中18号峰与药材中对应谱峰的确定。注射液中18号峰的纯质谱，记为S1。根据公式对茵陈药材数据中保留时间为35.5～40min的部分作相关色谱分析，可得注射液中18号峰与茵陈药材图谱的光谱相关色谱（见图1b） 。在光谱相关色谱中，35.5～40min的相关系数值最大为0.9988，很接近1，其对应的色谱流出时间与茵陈药材的24号峰 （见图1） 的一致，这说明注射液中的组分18与茵陈药材图谱中组分24的质谱十分相似，应为同一物质。用相同方法对注射液