重组技术工具1.pptVIP

1.1 DNA重组技术的基本工具 * 生长快、肉质好的转基因鱼(中国) 乳汁中含有人生长激素的转基因牛(阿根廷) 过程分析 * * 基因工程的概念： 基因工程的别名 基因拼接技术或DNA重组技术 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 结果 * DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具（“分子手术刀”） ——限制性核酸内切酶 DNA片段的连接工具（“分子缝合针”） ——DNA连接酶 基因转移工具（“分子运输车”） ——基因进入受体细胞的载体 　　 * 思考 ： 原核生物为什么没有在长期的进化过程中由于外源DNA的入侵而灭绝，有什么保护机制？ 限制性内切酶从哪里寻找？ 1. 限制性核酸内切酶——“分子手术刀” * 限制性核酸内切酶的作用特点： 能识别DNA双链特定核苷酸序列； 从特定部位的两个核苷酸之间切开。 * 黏性末端和平末端 * * 连接酶种类： 黏性末端 平末端 * 　　 DNA聚合酶和DNA连接酶有何相同和不同点？ 阅读思考： * 3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车” 　　 （2） 运载体的作用： 质粒、 噬菌体的衍生物 动植物病毒等 将外源目的基因导入受体细胞 （1）常用的运载体： * （3）作为载体的必要条件 1、能够在受体细胞中能稳定地保存并能复制 2、对受体细胞无毒害作用 3、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接； 4、具有某些标记基因，便于进行筛选。（如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 ） * 常用的受体细胞： 大肠杆菌 谷草杆菌 酵母菌 动植物细胞 * 达标练习 在基因工程中，切割运载体和含有目的基因的DNA片段，需使用（ ） 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 基因工程常用的受体细胞有（ ） (1)大肠杆菌 （2）枯草杆菌 （3）支原体 （4）动植物细胞 A. （3）（4） B. （1）（2）（4） C. （2）（3）（4） D. （1）（2）（3） * A、 BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B、 BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C、 EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT— D、 BamHI和BglII；末端互补序列—GATC— 限制酶是一种核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上 特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI， EcoRI，HindⅢ以及BglⅡ的辨识序列。箭头表示 每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶 所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合？其正确 的末端互补序列为何？（ ） * 不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 （ ） B、有多个限制酶切点 C、具有标记基因 D、它是环状DNA D 补救练习 * 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的步骤是 （ ） A、人工合成目的基因 B、目的基因与运载体结合 C、将目的基因导入受体细胞 D、目的基因的检测和表达 C * 一、基因工程的概念. 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制性核酸内切酶---”分子手术刀” 2. DNA连接酶---”分子缝合针” 3 基因的运载工具——运载体：具备条件 本课小结： 分类 作用 来源 作用 特点 结果 * 作业： 重组DNA分子的模拟制作。 效果分析： * *