《微生物学教学课件》李方-问答题.docVIP

第四章 微生物的营养(P99) 1、能否精确的确定微生物对微量元素的需求？为什么？ 不能。微量元素是指那些在微生物生长过程中起重要作用，而机体对这些元素的需要量极其微小的元素。由于不同微生物对营养物质的需求不尽相同，微量元素的概念也是相对的。微量元素通常混杂在天然有机营养物、无机化学试剂、自来水、蒸馏水、普通玻璃器皿中，在配制培养基时没有必要另外加入微量元素。 2、为什么微生物的营养类型多种多样，而动植物营养类型则相对单一？ 3、为什么生长因子通常是维生素、氨基酸、嘌呤、和嘧啶，而葡萄糖通常不是生长因子？ 生长因子通常指那些微生物生长所必须且需要量很少，但微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。维生素、氨基酸或嘌呤(嘧啶)通常作为酶的辅基或辅酶，以及用于合成蛋白质、核酸，是微生物生长所必需且需要量很小，而微生物(如营养缺陷型菌株)自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。而葡萄糖通常作为碳源和能源物质被微生物利用，需要量较大，而且其他一些糖类等碳源物质也可以代替葡萄糖满足微生物生长所需。 4、与促进扩散相比，微生物通过主动运输吸收营养物质的优点是什么？ 主动运输与促进扩散相比的优点在于可以逆浓度运输营养物质。通过促进扩散将营养物质运输进入细胞，需要环境中营养物质浓度高于胞内，而在自然界中生长的微生物所处环境中的营养物质含量往往很低，在这种情况下促进扩散难以发挥作用。主动运输可以逆浓度运输，将环境中较低浓度营养物质运输进入胞内，保证微生物正常生长繁殖。 5、以伊红美蓝（EMB）培养基为例，分析鉴别培养基的作用原理。 鉴别培养基是用于鉴别不同类型微生物的培养基。EMB培养基含有伊红和美蓝两种染料作为指示剂，大肠杆菌可发酵乳糖产酸造成酸性环境时，这两种染料结合形成复合物，使大肠杆菌菌落带金属光泽的深紫色，而与其他不能发酵乳糖产酸的微生物区分开。 6、以大肠杆菌烯醇丙酮酸磷酸—磷酸糖转移酶系统（PTS）为例解释基团转位。 大肠杆菌PTS由5种蛋白质（酶Ⅰ、酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶Ⅱc及热稳定蛋白质HPr）组成，酶Ⅱa、酶Ⅱb、酶Ⅱc　3个亚基构成酶Ⅱ。酶Ⅰ和HPr为非特异性细胞质蛋白，酶Ⅱa也是细胞质蛋白，亲水性酶Ⅱb与位于细胞膜上的疏水性酶Ⅱc相结合。酶Ⅱ将一个葡萄糖运输进入胞内，磷酸烯醇式丙酮酸上的磷酸基团逐步通过酶Ⅰ和HPr的磷酸化和去磷酸化作用，最终在酶Ⅱ的作用下转移到葡萄糖，这样葡萄糖在通过PTS进入细胞后加上了个个磷酸基团。7、*以紫色非硫细菌为例，解释微生物营养类型的可变性及其对环境变化适应能力的灵活性。 它在没有有机物时可以同化CO2，为自养型微生物；而当有机物存在时，它又可以利用有机物进行生长，此时为异养型微生物。在光照和无氧条件下可以利用光能生长，为光能营养型微生物；而在黑暗与有氧条件下，依靠有机物氧化产生的化学能生长，则为化能营养型微生物。 8、试分析在主动运输中，ATP结合性盒式转运蛋白（ABC转运蛋白）系统和膜结合载体蛋白（透过酶）系统的运行机制及两者的区别。 （1）ABC转运蛋白常由两个疏水性跨膜结构域与胞内的两个核苷酸结合结构域形成复合物，跨膜结构域在膜上形成一个孔，核苷酸结合结构则可结合ATP。ABC转运蛋白发挥功能还需要存在于周质空间（G＋菌）或附着在质膜外表面（）的底物结合蛋白的帮助。底物结合蛋白与被动运输物质结合后再与ABC转运蛋白结合，借助于ATP水解释放的能量，ABC转运蛋白将被运输物质转运进入胞内。（2）膜结合载体蛋白也是跨膜蛋白，被运输物质在膜外表面与透过酶结合，而膜内外质子浓度差在消失过程中，被运输物质与质子一起通过透过酶进入细胞。（3）被运输物质通过ABC转运蛋白系统和通过透过酶进入细胞的区别在于能量来源不同，前者依靠ATP水解直接偶联物质运输，后者依靠膜内外质子浓度差消失中偶联物质运输。 思考题：如果要从环境中分离能利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物，你如何设计实验？ （1)从苯含量较高环境中采集土样或水样；(2)配制培养基，制备平板，—种仅以苯作为唯一碳源(A)，另—种不含任何碳源作为对照(B)；(3)将样品适当适稀释(十倍稀释法)，涂布A平饭；(4)将平板置于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生；（5)将A平板上的菌落编号并分别转接至B平板，置于相同温度条件下培养(在B平板上生长的菌落是可利用空气CO的自养型微生物)；(6)挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A 平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用苯作为碳源和能源的微生物纯培养物；(7)将初步确定的目标菌株转接至以苯作为惟一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵实验，利用相应化学分析方法定量分析该菌株分解利用苯的情况。 第五章 微生物的代谢 1、胃八叠球菌和运动发酵单胞