《仪器分析教学课件》第四章 紫外可见.pptVIP

* 1.光源 2、4、7、9. 狭缝 3.激发单色器 5.样品池 6.表面吸光物质 8.发射单色器 10.检测器 11.放大器 12.指示器 13.记录器 4.7.5 荧光和磷光分析仪器 荧光分光光度计结构示意图 * 1、光源 汞 弧灯 氙弧灯 激光光源 荧光光源强度 紫外-可见吸收光谱光源强度 激光诱导荧光 Laser Induced fluorescence 低压汞灯：254 nm 2、单色器 滤光片 棱镜 光栅 * 在测量分子荧光强度时，要在与入射光成直角的方向上进行测量，这是由于（ ） A. 只有在入射光线成直角的方向上才有荧光 B. 荧光强度比透射光强度小 C. 荧光强度比透射光强度大 D. 荧光波长比透射光波长长 E. 荧光是向各个方向发射的，为了减小透射光的影响 荧光分光光度计常使用的光源是（ ） A. 空心阴极灯 B. 氙灯 C. 氢灯 D. 硅碳棒 B E * 4.7.6 荧光和磷光分析的应用 1.无机化合物的分析 采用有机试剂进行荧光分析的元素已近70多种 能够与金属离子形成荧光络合物的有机试剂绝大多数是芳香族化合物。（分子刚性平面结构增大） 另一类络合物是三元离子缔合物。 例：罗丹明B为阳离子荧光染料，Au3+、Ga3+、Tl3+等阳离子首先与卤素离子形成二元络阴离子，再与罗丹明B缔合形成荧光化合物。 荧光猝灭法也是常采用的方法。 * 2. 有机化合物的分析 脂肪族有机化合物本身能发荧光的很少，需要与某些试剂反应后才能进行荧光分析 芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系，多数能发生荧光，可直接用荧光法测定。对具有致癌活性的多环芳烃，荧光分析法已成为最主要的测定方法。 在生物化学分析、生理医学研究和临床、药物分析领域，许多重要的分析对象，如维生素、氨基酸和蛋白质、胺类、甾族化合物、酶和辅酶等，均可用荧光法分析。 * 4.7.7 化学发光简介 某一化学反应产生电子激发态产物，当其返回基态时发出光的现象称为化学发光。 能产生化学发光的物质有限，常含有-CO-NH-NHR基团。最常见的化学发光物质是luminol。 化学发光仪器简单，选择性高，操作简单，灵敏度高，利于痕量组分的分析。 （1）关于荧光光谱和激发光谱，叙述错误的是（ C ） A. 荧光光谱的形状与激发光的波长无关 B. 荧光光谱和激发光谱一般是对称镜像关系 C. 荧光光谱是分子的吸收光谱 D. 荧光激发光谱和紫外吸收光谱的形状相似 （2）溶液温度降低通常会使荧光效率 增加 。 （3）在高浓度时荧光物质的浓度增加，荧光强度 减少 。 （4）下列化合物中，哪种物质的荧光效率最大（ D ） A. 苯 B. 联苯 C. 萘 D. 芴 E.蒽 （5）下列说法中正确的是（ C ） A. 长共轭结构使得分子的荧光波长向短波方向移动。 B. 分子的刚性越强，荧光强度越小。 C. 给电子取代基可导致荧光增强。 D. 吸电子取代基可导致荧光增强。 * ?S对lgC作图建立校正曲线 习题P73-9 * 习题P73-9 * 习题P95-9 * 习题P95-9 A=0时，C = 8.68? 10-5mol/L C0 = 8.68? 10-5?5.5?6.941?1000/0.500 = 6.63ug/mL * * * * * * * * * * * * * 220～280nm无吸收 饱和碳氢化合物、含助色团的饱和有机化合物、不含共轭体系、没有醛酮等基团。 210～250nm有吸收带 可能含有两个共轭基团。 260、300、330nm左右有强吸收带 可能含有3～5个共轭基团。 270～300nm有弱吸收带 可能有羰基存在。 250～300nm有中等强度吸收带，并含有振动结构，表示有苯环存在 化合物有颜色，共轭基团一般在5个以上。 有机化合物结构分析 * 异构体的推定 例如，乙酰丙酮存在酮式和烯醇式两种异构体 在极性溶剂水中，以酮式异构体为主，形成分子间氢键，?max为277nm； 在非极性溶剂己烷中，以烯醇式异构体为主，形成分子内氢键，?max为269nm。 * 化合物骨架的推定 未知化合物与已知化合物的紫外吸收光谱一致时，可以认为两者具有同样的发色团，据此可以推断未知化合物的骨架。 （A） （B） * 4.6.2 定量分析 应用最广泛、最有效的定量分析手段之一。 （1）可用于无机及有机体系