生物信息的传递(下)——从mRNA到蛋白质讲解.ppt

生物信息的传递（下） —从mRNA到蛋白质 翻译：指将mRNA链上的核甘酸从一个特定的起始位点开始，按每三个核甘酸代表一个氨基酸的原则，依次合成一条多肽链的过程。 在合成的各个阶段还有许多蛋白质、酶和其他生物大分子参与 在真核生物细胞中有 70种以上的核糖体蛋白质， 20种以上的氨酰—tRNA合成酶(AA—tRNA合成酶) 10多种起始因子、延伸因子及终止因子， 50种左右的tRNA，各种rRNA、mRNA 100种以上翻译后加工酶参与蛋白质合成和加工过程。 蛋白质合成是一个需能反应，要有各种高能化合物的参与 在真核生物中有将近300种生物大分子与蛋白质的生物合成有关，细胞用来进行合成代谢的总能量的90％消耗在蛋白质合成过程中，而参与蛋白质合成的各种组分约占细胞干重的35％。 ● 遗传密码——三联子 ● tRNA的结构、功能与种类 ● 核糖体的结构与功能 ● 蛋白质合成的过程 ● 蛋白质的运转机制 一、遗传密码——三联子 （一）三联子密码定义 mRNA链上每三个核甘酸翻译成蛋白质多肽链上的一个氨基酸，这三个核甘酸就称为密码子或三联子密码(triplet coden) 。 （二）三联子密码破译 为什么3个核苷酸决定一个氨基酸呢？ ???mRNA中只有4种核苷酸，而蛋白质中有20种氨基酸，若以一种核苷酸代表一种氨基酸，只能代表4种(4^1=4)。若以两种核苷酸作为一个密码（二联子），能代表4^2=16种氨基酸。而假定以3个核苷酸代表一个氨基酸，则可以有4^3=64种密码，满足了编码20种氨基酸的需要。 50-60年代破译遗传密码方面的三项重要成果：?? （1）Paul Zamecnik等人证实细胞中蛋白质合成的场所。他们把放射性标记的氨基酸注射到大鼠体内，经过一段时间后取其肝脏，进行蔗糖梯度沉淀并分析各种细胞成份中的放射性蛋白质。 ??? 如果注射后经数小时（或数天）收获肝脏，所有细胞成份中都带有放射性标记的蛋白质;??? 如果注射后几分钟内即收获肝脏，那么，放射性标记只存在于含有核糖体颗粒的细胞质成份中。 2）Francis Crick等人第一次证实只有用三联子密码的形式才能把包含在由AUGC四个字母组成遗传信息（核酸）准确无误地翻译成由20种不同氨基酸组成的蛋白质序列，实现遗传信息的表达。实验1:??? 用吖啶类试剂（诱导核苷酸插入或丢失）处理T4噬菌体rII位点上的两个基因，使之发生移码突变（frame-shift），就生成完全不同的、没有功能的蛋白质。 密码子的实验证明 实验2:??? 研究烟草坏死卫星病毒发现，其外壳蛋白亚基由400个氨基酸组成，相应的RNA片段长1200个核苷酸，与密码三联子体系正好相吻合。 实验3:??? 以均聚物为模板指导多肽的合成。 在含有tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板来决定。 ??? 1961年，Nirenberg等以poly（U）作模板时发现合成了多聚苯丙氨酸，从而推出UUU代表苯丙氨酸（Phe）。以poly（C）及poly（A）做模板分别得到多聚脯氨酸(Pro)和多聚赖氨酸(Lys)。 实验4:??? 以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽，?5‘…UGU GUG UGU GUG UGU GUG…3’,不管读码从U开始还是从G开始，都只能有UGU（半胱氨酸,Cys）及GUG（缬氨酸,Val）两种密码子。 实验5:??? 以共聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种起读方式： 5’…UUC UUC UUC UUC UUC…3’或 5’…UCU UCU UCU UCU UCU…3’或 5‘…CUU CUU CUU CUU CUU…3’分别产生UUC（Phe）、UCU（Ser）或CUU（Leu）.??? 多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽：5’…GUA GUA GUA GUA GUA…3’或5’…UAG UAG UAG UAG UAG…3’或5’…AGU AGU AGU AGU AGU…3’由第二种读码方式产生的密码子UAG是终止密码，不编码任何氨基酸，因此，只产生GUA（缬氨酸,Val）或AGU（丝氨酸,Ser）。 实验6:??? 以随机共聚物指导多肽合成。Nirenberg及Ochoa等又用各种随机的多聚物作模板合成多肽。例如，以只含A、C的多聚核苷酸作模板，任意排列时可出现8种三联子，即CCC、CCA、CAC、ACC、C