一轮课件：第23讲从杂交育种到基因工程资料.ppt

D 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 　537 bp、790 bp、661 bp　 平 BamH Ⅰ　 抗生素B 4 同种限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D与质粒反向连接 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 限制性核酸内切(或限制) 启动子 胰蛋白 RNA RAS蛋白 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 反转录　 限制酶 PCR技术 DNA双链复制 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 基因表达载体的构建 启动子、终止子、目的基因 农杆菌转化法 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上 DNA分子杂交 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 网络构建 强化审答·规范解题 集训真题·体验高考 练出高分 第23讲从杂交育种到基因工程 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 网络构建 考点一 生物变异在育种上的应用 考点一 生物变异在育种上的应用 基因 重组 杂交 简单 长 基因 突变 辐射诱变 突变 率 少 大量 自交 选种 自交 考点一 生物变异在育种上的应用 种子或 幼苗 简单 较短 染色 体变 异 秋水 仙素 育 种年限 基因 重组 定向 考点一 生物变异在育种上的应用 单倍体育种 杂交育种 诱变育种 多倍体育种 基因工程 考点一 生物变异在育种上的应用 易 错 警 示 操作水平： 水平。 原理： 。 优点：克服 的障碍，定向改造生物的 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 基因拼接技术 加以 修饰改造 定向地 DNA 基因重组 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 2.基因的“针线”——DNA连接酶 (1)种类：按来源可分为E·coli DNA连接酶和 。 (2)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶 切开的两个核苷酸之间的 。 3.基因的“运输工具”——运载体（质粒、λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等） ①质粒本质：小型环状DNA分子。 ②质粒作用。 a.作为运载工具,将目的基因运送到受体细胞中去。 b.在受体细胞内对目的基因进行大量复制。 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 ③条件 a.能在受体细胞内稳定保存并大量复制。 b.有多个限制酶切点,供外源基因插入。 c.有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 d.对受体细胞无害 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 一、PCR反应/多聚酶链式反应 1. 原理：DNA 原理和DNA 原理,即： 解旋 降温 双链复制的 热变性 高温 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 2. 过程： (1)变性：当温度上升到90℃- 95℃时,双链DNA解旋为单链。 (2)复性：温度下降到55℃- 60℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 变性——复性——延伸 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 (3)延伸：温度上升到70℃-75 ℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在热稳定DNA聚合酶（Taq酶）的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 3.特点：______能特异地复制处于_________之间的DNA序列,使这段固定长度的序列呈_____扩增。 Taq酶 两个引物 指数 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 4.细胞内DNA复制与PCR技术的比较： 项目 DNA复制 PCR扩增 不 同 点 场所 细胞内 细胞外 能量 ATP提供能量 不需ATP提供能量 酶 解旋酶、DNA聚合酶 Taq酶/热稳定DNA聚合酶 特点 边解旋边复制, 半保留复制 完全解旋 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 项目 DNA复制 PCR扩增 不同点 循环 次数 受生物体自身控制 30多次 缓冲液 不需要 需要人为控制 设备 无 PCR扩增仪/严格控制温度 变化的温控设备 相 同 点 原料 四种脱氧核苷酸（PCR用脱氧核苷三磷酸） 模板 DNA 引物 都需要与模板相结合的引物 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 考点二 基因工程的操作工具及基本步骤 最核心、最关键 a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代 b、使目的基因能表达和发挥作用 生物种类 植物 动物 微生物 受体细胞