2.8 基因治疗幻灯片.pptVIP

一、基因治疗的概念 ◆基因治疗（gene therapy）——就是向有功能缺陷的细胞补充相应功能基因，以纠正或补偿其基因缺陷，从而达到治疗的目的。 原位修复(基因修复）：对有缺陷的基因在原来位置上进行修复，使该基因恢复正常 基因替代疗法：治疗策略是切除发生缺陷的基因，再转入有功能的正常 基因增强：将目的基因导入靶细胞，目的基因的表达产物可以补偿缺陷细胞的功能 基因抑制：导入外源基因以抑制原有的基因，目的在于阻断有害基因的表达 基因治疗的前景分析 基因治疗：降低成本 理论上所有治疗基因（包括非分泌蛋白）均可开展基因治疗 基因治疗：技术上难度大，有效性和安全性要求高 基因治疗：仅10余年历史，技术不够成熟，风险大 三、基因治疗的两大途径 四、基因转移的方法 病毒载体 逆转录病毒载体 腺病毒载体 单纯疱疹病毒载体 非生物学方法 直接注射 脂质体 受体介导 （一）基因治疗的病毒载体 应该具有的基本条件： 携带外源基因并能组装成病毒颗粒 介导外源基因的转移和表达 对机体没有致病能力 充分了解载体病毒的基因组结构和功能（编码区/非编码区、结构蛋白/非结构蛋白、必须基因/非必须基因、包装容量等） 外源基因插入病毒基因组的非必须区 致病基因（裂解细胞、癌基因使细胞转化）?删除 插入外源基因长度受限?删除非必须基因/必须基因（由辅助病毒或宿主细胞提供该基因的功能） （二）非病毒载体 1. 裸DNA 2. 脂质体/DNA复合物 3. 多聚物/DNA复合物 4. 其它方法 1. 裸DNA 方法：直接注射或基因枪轰击 溶液类型对基因表达有影响： 重组DNA可贮存于5%-30%的蔗糖溶液中 也可用生理盐水或PBS 2. 脂质体/DNA复合物 形成高效包装DNA的人造膜，与细胞膜极为相似。 形成脂质双层包围水溶液的脂质微球，与细胞融合后被细胞内吞。 无毒性和免疫原性 可生物降解，不会在体内堆积 可制成球状(0.03-50 ?m)，包容大小不同的生物分子 可带有不同的电荷 具有不同的膜脂流动性、稳定性、及温度敏感性，能适应不同的生理要求 阳离子多聚体 DNA带负电 细胞表面带负电 转入功能基因（单基因遗传病） 血友病B 薛京伦等用逆转录病毒载体将IX因子的cDNA至血友病B患者的皮肤成纤维细胞中，再回植患者皮下，患者凝血因子IX的表达明显增高，症状得到改善 重症综合性免疫缺乏症（SCID） 基因治疗SCID的过程 转基因治疗的问题与危险性 有效的目的基因过少； 安全性:导入的基因缺乏调控手段； 有效性和稳定性：缺少高效和导向的载体系统； 目前人们多重视分子水平的研究而忽略了整体研究，对整体宏观水平缺乏了解。 六、基因治疗关键问题 基因治疗在未来人类重大疾病的预防和治疗上必将发挥越来越大的作用！ 七、基因诊断（Gene Diagnosis） G到T一个碱基的改变，决定了一个人的命运 小皓珩出生23个月就出现皮疹、便血等病状，患上了罕见的原发性免疫缺陷病。 DNA序列分析，证实了小皓珩WAS蛋白基因的1388位核苷酸由G突变为T，使编码谷氨酸的密码GAG突变为终止密码TAG WAS蛋白突变为无功能的WAS蛋白，导致患儿血小板减少，淋巴细胞形态和功能异常 希望：WAS目前已经可以用骨髓移植或干细胞移植根治 传统与基因诊断的比较 传统的诊断 望 问 听 触——经验 化验/检验——微生物、免疫学、生物化学、病理学等对细胞、组织、酶、代谢物等检测 影像学—X线、B超、CT、核磁共振、内窥镜等 特殊检查—肌电/脑电/心电、骨密度等 基因诊断 应用分子生物学方法：如PCR技术或PCR与分子杂交标记 主要应用于 先天遗传性疾患（苯丙酮尿症、血红蛋白病） 后天基因突变引起的疾病（肿瘤、糖尿病） 病原生物的侵入（流感、肝炎、艾滋病） 个体识别、法医物证 个体识别 公安司法系统——罪犯及受害人的身份识别及亲子鉴定 部队—— 伤亡士兵的身份识别；印尼海啸中死难人员身份识别 保安—— 个人DNA身份证，用于人员识别 作业： “英国研究人员2007年4月12日宣布，他们在世界上首次确认了一个与肥胖相关的等位基因，他们将之称为FTO。这一研究成果发表在《科学》杂志上。”如果你是一名肥胖症患者，你将如何根据这一新发现对自己进行治疗？请简要写出治疗方案。 “统计表明，全世界HBV（乙型肝炎）感染者和携带者达3.5亿人之多。我国属HBV感染高流行区。2004年中国疾病预防控制中心对中国居民营养与健康状况调查的血样进行乙型肝炎病毒标志物的检测表明，我国现有的慢性HBV感染者约1.2亿人，其中慢性乙型肝炎患者约3000万例。”请你根据所学知识，谈谈用现代生物技术对乙型肝炎的诊断及治疗方法。 Fig.2. Figure showing the enhanced t