chapter7 DNA replication.ppt

真核生物DNA的负调控 S-Cdk触发pre-RC的启动，同时阻止重新起始复制 Geminin蛋白 图4-36 真核细胞DNA复制叉的结构模型 生老病死,是人类生命最为简洁的概括但其中却蕴藏了无数的奥秘 2009年诺贝尔生理学或医学奖授予美国加利福尼亚旧金山大学的伊丽莎白·布莱克本(Elizabeth Blackburn)、美国巴尔的摩约翰·霍普金斯医学院的卡罗尔-格雷德(Carol Greider)、美国哈佛医学院的杰克·绍斯塔克(Jack Szostak)以及霍华德休斯医学研究所，以表彰他们发现了端粒和端粒酶保护染色体的机理。 图4-25 端粒DNA的防“修复”机制 图4-26 端粒酶的结构模型 * * 端粒合成的一种模型 3′ 5′ TTTTGGGGTTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A AA 3′ 5′ TTTTGGGGTTTTGGGGTTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A AA T TGGG TGGG T 3′ 5′ AA TTTTG 5′ 3′ AAAACCCCAAAACCC C C C A GTTTTG 整合和杂交 移位和再杂交 端粒合成的完成 TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGTTTT 5′ 3′ n AA 3′ TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGT 5′ 3′ TT CCCCT n AA 3′ TTTTGGGG TTTTGGGG TTTTGGGGT 5′ 3′ TT AAAACCCC AAAACCCC AAAACCCCT n 进一步加工 继续延伸 * 3 HO 5 3? 5? 3? 5? 引物酶催化合成短链RNA引物分子 引物 引物酶 5′ 3′ p p p p OH 3′ A C T G 1′ 图4-23 DNA连接酶的三步核苷酸转移反应 图4-24 依赖于ATP的DNA连接酶的作用机理 DNA ligase modify gap Mg2+ ligase ATP or NAD＋ AMP+PPi or NMN+AMP A T C G P T T P P P A A C C T G A P A C P P P P OH T G G A T C G P T T P P P A A C C T G A P A C P P P T G G P nick 3 3 5 5 5 5 3 3 template template 图4-14 DNA polI催化的缺口平移 真核生物的DNA聚合酶（详见p145 ） 原核生物DNA复制的过程：起始 细菌复制起点含有3个13-mers和4个9-mers同源结构域 酵母菌的复制起点称自主复制序列 (ARS).? 其中“A” 区域是必须的, 而 B1, B2和 B3 可以增强复制效率.? 图4-28 E. coli的OriC结构 图4-29 E. coli DNA复制过程中引发体的形成 图4-30 E. coli DNA复制过程中复制体的形成 图4-31 E. coli DNA复制的延伸 原核生物DNA复制的过程：延伸 DNA延伸经过复杂模版区 出现复制错误 引起DNA聚合酶“停顿”（stalling，pausing）或与模板链解离 该区段DNA序列不能合成 合成策略： DNA跨缺刻合成（back-up pathway） 重组依赖的DNA复制 DNA合成重新开始 3’ 5’ β夹子 ?复合体 Core X Pol III 3’ RecA+ATP RecA* RecA* RecA* SSB pol V A X 图5-20 DNA polV参与的跨损伤合成的详细步骤 DNA合成的终止 线性ＤＮＡ终止策略 ＤＮＡ末端变成发夹结构 利用ＤＮＡ末端蛋白所含的氨基酸侧链ＯＨ 线性ＤＮＡ转化成环状ＤＮＡ 利用端粒酶策略 利用同源重组辅助策略进行末端合成 DNA合成的终止 利用和DNA末端结合的蛋白质中的OH引导DNA的合成：如病毒 把线性DNA转化成环形DNA分子：如微生物 大肠杆菌基因组DNA合成终止：Ter位点（DNA synthesis termination region） 图4-32 E. coli DNA复制终止区的结构 图4-33 子代DNA的分离 复制的起始 识起点,解超旋. 解双链,复制叉. 复制体,成回环. 复制的延伸 3′→5′模板链, 5′→3′长子链. 5′→3′模板链, 5′→3′断子链. 复制的终止 切引物,补缺口. 连片段,成子链. 解旋酶 DNA聚合酶III 解链酶 RNA引物