海洋药物实验指导2007.docVIP

《海洋药物实验指导》 实验须知 实验一 用离子交换法从海带中提碘 实验二 高效液相色谱法测定黄芩苷的含量 实验须知 海洋药物实验教学是海洋药物课程的重要组成部分，是使学生进一步理论联系实际，掌握从海洋生物中提取、分离和鉴定有效成分的基本操作技能，提高学生分析和解决问题能力。养成严谨科学态度和良好工作作风必不可少的教学环节。为此，提出下列实验须知： 1．遵守实验室制度，维护实验室安全，不违章操作，严防爆炸、着火、中毒、触电、漏水等事故的发生。若发生事故应立即报告指导教师。 2．实验前作好预习，明确实验内容，了解实验的基本原理和方法，安排好当天计划，争取准时结束。实验过程应养成及时记录的习惯。凡是观察到的现象和结果及有关数据，应立即如实记录，实验完毕后，认真总结，写好报告。 3．实验室中保持安静，不许大声喧嚷，不许抽烟、不迟到、不随便离开，实验台面应保持清洁，使用过的仪器及时清洗干净，存放在实验柜内，废弃的固体和滤纸等丢入废物缸内，绝不能丢入水槽、下水道和窗外，以免堵塞和影响环境卫生。 4．公用仪器及药品用完后立即返还原处，破损仪器应填写破损报告单，注明原因。节约用水、用电、药用试剂。严格药品用量。 5．保持实验室内整洁，学生采取轮流值日，每次实验完毕，负责整理公用仪器，将实验台、地面打扫干净，倒清废物缸，检查水、电和门窗是否关闭。实验一 用离子交换法从海带中提碘 （一）实验目的 用离子交换法从海带中提碘涉及一系列物理化学过程，有助于学生理解卤素单质的提取分离，利用海洋资源，并能初步掌握离子交换剂应用技术，了解色谱分离方法。 （二）主要仪器及试剂 交换吸附装置，721型分光光度计，250mL梨型分液漏斗 H2O2：直接取A.R纯或C.P纯试剂 10%NaOH：将20克溶解在200mL水中 10%NaCl：将50克NaCl溶解在500mL水中 10%NaNO2：将20克NaNO2溶解在200mL 水中海带 6MH2SO4：在333 mL水中边搅拌边加入167mL浓硫酸 40%NaOH：将40克NaOH溶解在100 mL水中 （三）实验原理 海带中所含的碘一般以I－离子状态存在。用水浸泡海带，I－离子及其它可溶性有机质如褐藻糖胶等进入浸出液中。若用海带重量13－15倍的水量浸泡海带，可使浸出液中I－离子含量达到0.5～0.55克/升。海带浸出液中褐藻糖胶的存在妨碍碘的提取，应预先除去。 一般采用碱化絮凝法使其生成褐藻酸钠絮状沉淀而沉降。由于强碱性阴离子交换树脂对多碘离子I3－或I5－离子的交换吸附量（700～800克/升树脂）远远大于对I－离子的吸附量（150～170克/升树脂），因此常将海带浸出液中的I－离子部分氧化使生成I3－或I5－离子，再被树脂交换吸附。 一般采用在酸性条件下加入适量氧化剂，如NaClO或H2O2的方法使I－离子氧化并生成多碘离子以利于交换吸附，氧化及交换反应方程式如下： 2I－＋ClO－＋2H+ I2＋Cl－＋H2O 或 2I－+2H++H2O2 I2+2H2O I2＋I－ I3－ R－Cl＋I3－ R－I3＋Cl－ 吸附碘达饱和的树脂呈黑红色。先后用氢氧化钠溶液及氯化钠溶液处理树脂，可以将碘洗脱。氢氧化钠溶液洗脱碘主要是发生了歧化反应，洗脱液中含有I－和IO3－离子： 3R－I3＋6NaOH 3R－I＋5NaI＋NaIO3＋3H2O 氯化钠溶液洗脱碘则是发生了如下的交换反应，I－离子进入洗脱液中，树脂同时被再生为氯型： R－I＋NaCl R－Cl＋NaI 往碱性洗脱液中加酸，由于溶液pH值的变化，发生逆歧化反应而析出泥状粗碘： 5NaI＋NaIO3＋3H2SO4 3I2＋3Na2SO4＋3H2O 氯化钠洗脱液经酸化后再加氧化剂如NaNO2或KClO3溶液，也能使I－离子氧化生成I2。NaNO2使I－离子氧化生成碘的离子方程式如下： 2I－＋2NO2－ ＋4H+ I2＋2NO＋2H2O 通过离心分离即获得泥状粗碘。 （四）实验步骤 1、浸泡海带 取海带500克，加13～15倍水量分两次浸泡，得浸出液6000毫升左右，碘含量为0.5克/升（由实验准备室预先浸泡，可供5～6人实验用）。 2、碱化浸出液除褐藻糖胶 即海带浸出液1000毫升，加入浓度为40% 的NaOH溶液，控制pH值为12左右，充分搅拌后澄清。采用倾析法分离出清液。 3、氧化游离 于上述清液中加入浓度为6mol·L-1的H2SO4溶液，使pH值为1.5～2。往酸化溶液中加入NaClO溶液或H2O2溶液，充分搅拌并观察溶液颜色变化。待溶液由淡黄逐渐变成棕红色即表明I－离子已转变为多碘离子。（用淀粉－KI试纸检验）。 4、交换吸附 将强碱性阴离子交换树脂（已转为氯型）注入交换柱中（树脂层高度为12cm），连接交换装置，