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不同苹果砧木组培苗抗旱性的比较研究 　　摘 要： 【目的】为了提供苹果耐旱育种及栽培材料，【方法】以5种苹果砧木组培苗为试材，PEG-6000作为胁迫剂，模拟室外干旱进行处理，运用模糊隶属函数抗旱性综合分析，比较了5个苹果砧木组培苗的耐旱性。【结果】结果表明，在PEG-6000胁迫条件下，不同苹果砧木的叶绿素含量总体均呈下降趋势，叶片的相对电导率和MDA含量随PEG-6000胁迫质量分数的升高逐渐升高。在整个胁迫过程中，各苹果砧木组培苗叶片内蛋白质含量随胁迫质量分数的升高而增大。SOD活性随PEG-6000胁迫质量分数的升高呈先升高后下降趋势，且在20%PEG-6000胁迫条件下SOD活性达到了最大。POD活性随胁迫质量分数的升高呈现出逐渐升高的趋势。【结论】5种苹果砧木的抗旱性顺序依次为：新疆野苹果平邑甜茶八棱海棠‘M26’‘M9’。 　　关键词： 苹果砧木组培苗； PEG-6000胁迫； 抗旱性评价 　　中图分类号：S661.1 文献标志码：A 文章编号：1009-9980？穴2013？雪01-0088-06 　　苹果是世界上栽培的主要果树，也是我国果树栽培中面积最大的树种。干旱是影响苗木成活与生长的重要限制因子[1]，也是一种影响植物生产最普遍的环境胁迫[2]，更是导致减产最严重的环境胁迫[3]。全球范围内因干旱导致的作物产量损失超过其他环境胁迫造成减产总和[4]，2005年巴西干旱缺水，导致巴西全国苹果产量直接减少35%[5]。因此选育抗旱性强的苹果砧木，用于维持苹果产量与品质、扩大栽培面积一直是干旱地区果树栽培的主要任务[6]。苹果树常规育种周期长，占地面积大，限制了耐旱性品种的选育与筛选。前人对苹果种质资源的抗旱性研究已为抗旱苹果品种的选育提供了很多理论依据[7]，但苹果砧木的抗旱性鉴定仍存在不少问题，例如：（1）对苹果矮化砧木和乔化砧木的抗旱性没有比较研究；（2）对品种的抗旱性鉴定花费时间长。而植物组织培养可以通过转基因手段或筛选基因突变体来缩短培育周期，有利于果树树种的选育。迄今国内外有关苹果组培苗抗旱性研究的相关报道较少，仅赵军营[8]对‘嘎拉’苹果进行过相关研究。本研究首先在材料选择上选取了矮化砧木‘M9’、‘M26’和乔化砧木八棱海棠、平邑甜茶、新疆野苹果进行对比，同时利用这些材料的组培苗作为试材，通过研究其对PEG-6000胁迫的反应，从而建立高效的苹果幼苗抗旱性早期鉴定技术体系，为苹果抗旱无性系筛选及资源鉴定提供依据。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　试验于2009年3月于西北农林科技大学苹果示范基地进行，以‘M9’、‘M26’、八棱海棠（M. micromalus Mak.）、平邑甜茶（M. hupehensis Rehd.）和新疆野苹果[M. sieversii （Ledeb） Roem.]5个苹果属树种的1 a生枝条为试材。将上述材料置于27 ℃温室内水培，每升水中加入1/8MS和5 g蔗糖，诱导芽的萌发，每5 d换水1次[9-10]。待芽长至1.5～2.0 cm 时，剪取嫩芽去掉大叶，在自来水下冲洗3～4 h，用体积分数为75%的酒精消毒10 s，结合质量分数为0.1%升汞消毒8 min后，用含50 mg?L-1抗坏血酸的无菌溶液冲洗3～4次茎尖后[11]，接种到MS+6-BA1.0 mg?L-1 +NAA0.1 mg?L-1附加500 mg聚乙烯吡咯烷酮的培养基中培养，待新芽长出后，切取新芽接入继代培养基（MS培养基加6-BA0.5～1.0 mg?L-1，IBA0～0.5 mg?L-1）中增殖。每瓶内接3～4个芽，光照12～14 h?d-1、光照强度2 000 lx，25 ℃条件下培养。 　　1.2 方法 　　不同材料的胁迫培养基为继代培养基附加不同质量分数的PEG-6000，分别为 0 （CK）、10% （B1）、15% （B2）、20% （B3）、25%（B4），共5水平，重复3次。在无菌条件下将培养到第4 代的不同苹果砧木组培苗修剪成1.0 cm左右带顶芽的茎段，接种于设计的培养基上，每个品种每一处理各接种20瓶，置于培养室内培养。培养条件：光照时间为12 h /d，光照强度为2000 lx，培养温度为 23～27 ℃， 相对湿度为50%～70%。培养30 d后进行不同指标的测定。 　　1.3 测定指标与方法 　　叶绿素含量和电导率的测定参照刘世鹏[12]的方法。超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、丙二醛（MDA）和可溶性蛋白（Pr）含量均参照孙群等[13]的方法测定。 　　1.4 苹果砧木抗旱性评定 　　植物抗旱性强弱受多种因子影响，通常用单一指标无法正确的评定，因此本试验通过对实验结果进行隶属函数[14]分析，对5种苹果砧木的