二维电泳详细过程资料.doc

北京六一仪器厂DYCZ-26C双向电泳系统检测报告 技术部 吴承疆 QQ:座机电话号码 实验原理： 双向电泳是一种分析从细胞、组织或其他生物样本中提取的蛋白质混合物的有力手段，已得到广泛应用。这项技术利用蛋白质的两种特性，分两步将不同的蛋白质分离。 第一向步骤为等电聚焦（IEF），即根据蛋白质的等电点（pI）差异将蛋白质分离。第二向步骤为十二烷基硫酸钠- 聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS），即利用蛋白质的分子量（Mr, 相对分子量）差异将蛋白质分离。双向凝胶电泳结果中的每个斑点都对应着样本中的一种蛋白。因此，可将上千种不同的蛋白质分离开来，并得到每种蛋白质的等电点、表观分子量等信息。 实验方法： 一.实验材料: 1.主要仪器和试剂（sigma,Ampholine购自GE） 主要试剂 超纯水（MiLiQ）、尿素、硫脲Thiourea 、Dithiothreitol，DTT、CHAPS、 Iodoacetamide，IAASodium Dodecylsulphate，SDS溴酚蓝Bromophenol Blue 、低熔点琼脂糖、过硫酸铵 Ammonium Persulfate APS 、TEMED（四甲基乙二胺）、丙烯酰胺、甲叉双丙烯酰胺；Tris碱、甘氨酸、硝酸银、无水碳酸钠、无水乙酸钠、硫代硫酸钠、甲醛、无水乙醇、冰醋酸、氢氧化钠、磷酸、甘油（丙三醇 glycerin ）、牛血清白蛋白（