草莓的脱毒培养10解析.ppt

脱毒的草莓试管苗 脱毒草莓苗 * * 第十四章 草莓的脱毒与快繁 草莓为蔷薇科草莓属多年生草本植物，植株矮小，呈半平卧丛状生长，基生三出复叶。果实为聚合瘦果生于花托上。 草莓喜光但又较耐荫，要求肥沃、疏松、透水、通气的中性微酸性或微碱性土壤。 （一）草莓脱毒 1. 病毒种类 草莓斑驳病毒、皱叶病毒、草莓镶脉病毒、轻型黄斑病毒等。 2. 脱毒方法 1）热处理脱毒（恒温或变温的热空气处理方法） 将草莓母株在40～41℃温度的特定容器内下处理1-2个月。 将母株和容器一起放在恒温箱中，母株必须带有成熟的叶片。每天光照16 h，光照强度5000 lx，白天温度38 ℃ ，夜间35 ℃ 。 2. 茎尖培养脱毒 1）初代培养 ：取草莓顶芽，用自来水流水冲洗2～4 h，然后剥去外层叶片，消毒，切取0.2 mm的茎尖。接入MS + BA0.25 + NAA0.25的培养基中。培养条件为22～25 ℃，日照16～18 h，光强3000 lx。 2）继代培养：把芽丛割成芽丛小块，转入新鲜的MS培养基中，令其长大，并进行分株，扩大繁殖。 3）生根培养：在培养基中加入NAA1（mg/L）或IBA1。 3. 无病毒苗的鉴定 抗血清法、电子显微镜法、指示植物法、酶联免疫吸附法（ELISA）等，确保脱毒后的试管苗不含病毒。 （二）快繁技术 1. 材料与消毒：经过热处理（6-7月）后的草莓母株上新抽的匍匐茎作外植体，未经热处理的于7-8 月的匍匐茎发生旺盛期，在无病虫害的田块，连续晴天3-4 d选取健壮、新萌发且未着地的匍匐茎段3 cm作为外植体。 外植体取来后流水冲洗材料2 h，进行表面消毒：洗涤灵水溶液洗去材料表面的油质；用70%酒精浸泡数秒除去蜡质；用3%的次氯酸钠溶液浸泡15-30 min，无菌水冲洗3 次。 把芽放在解剖镜下，无菌条件下，用镊子、刀片、解剖针等把芽外面的幼叶和叶原基去掉，暴露生长点。用利刀切下含1-2 个叶原基，0.5 mm的生长点，接种在培养基上。 2. 培养条件： 茎尖分化培养基： MS+6-BA0.5 mg/L+IBA0.1 mg/L 继代培养基：MS+6-BA 1 mg/L 生根前一次的继代培养基： MS+6-BA0.5 mg/L 生根培养基：1/2MS+IBA 1.0 mg/L 温度：23 ℃左右 光照：12 h 光照强度：2000 lx 3. 生长与分化 接种1-2 个月，茎尖在培养基上形成愈伤组织并分化出小的植株，将初次培养产生的新植株切割成带3-4 个芽的芽丛转入继代培养基中，每瓶3-4 个芽丛，3-4 周即可获得30-40 个腋芽形成的芽丛及植株。 4. 生根培养 为获得整齐健壮的生根苗，将芽丛切割开，单个芽转接到专门的生根培养基中生根，培养4 周后，即可长成4-5 cm高并有5-6 条根的健壮苗。 5. 试管苗的移栽 小心取出试管中的发根幼苗，用清水洗去附着的培养基，栽植到经过蒸汽消毒的培养土中，在温室内驯化。 每天叶面喷水3-4 次，4-5 d即可成活，展开新叶。人工补充光照，以促其健壮。 * *