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微生物培养与应用专题复习 典型例题： 例1. 某学校打算开辟一块食用菌栽培基地，以丰富学生的劳动技术课内容。首先对食用菌实验室进行清扫和消毒处理，准备食用菌栽培所需的各种原料和用具，然后从菌种站购来各种食用菌菌种。请回答下列问题： （1）对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料： 、 、 、 、 。其中提供氮源的是 ；提供能源的主要物质是 。 （2）微生物在生长过程中对各种成分所需量不同，配制培养基时各成分要有合适的 。在烧杯中加入琼脂后要不停地 ，防止 。 （3）将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后将若干个试管捆在一起，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入高压蒸汽灭菌锅中灭菌，压力 kPa，温度 ，时间 。灭菌完毕拔掉电源，待锅内压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应 。 （4）使用高压蒸汽灭菌锅时应注意，先向锅内倒入适量的水。把锅内水加热煮沸并将其中原有的 彻底排出后再将锅密闭。 【解析】本题考查牛肉膏蛋白胨固体培养基的成分及其作用。培养基的配置原则、方法以及灭菌的相关内容。根据上述讲解内容，固体牛肉膏蛋白胨培养基所需的原料包括五种成分，为牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水以及凝固剂琼脂；其中牛肉膏和蛋白胨都含有氮元素，可以提供氮源，由于牛肉膏富含水溶性糖，还可以提供能源；配置培养基的原则是目的明确，营养要协调，pH要适宜，因此我们可以确定培养基中各成分要有适合的比例，由于琼脂作为凝固剂，在加热熔化的过程中易糊底导致局部温度过高引起烧杯破裂，因此可采用不断搅拌的方法加以避免；高压蒸汽灭菌要求100 kPa，121℃条件下持续半小时后关闭电源，待冷却后取出试管搁置斜面，如果试管的棉塞沾有培养基，未能避免污染培养物则应该废弃不用；高压灭菌过程中，由于冷空气的密度大，所以加热煮沸后放出冷空气才能使锅内达到特定气压和达到特定的温度，否则灭菌效果差。 【答案】（1）牛肉膏 蛋白胨 水 无机盐 琼脂 蛋白胨、牛肉膏 牛肉膏 （2）比例 搅拌 琼脂糊底引起烧瓶破裂 （3） 100 121℃　　15～30min 废弃 （4）冷空气 例2. 分析下面培养基的配方： KH2PO4、Na2 HPO4、MgSO4·7H2O 、葡萄糖、尿素、琼脂。 请回答： （1）在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 和 。 （2）该培养基为 培养基（按物理状态分），因为培养基中含有 。 （3）想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？如果有，又是如何进行选择的？ 。 （4）在以尿素作为唯一氮源的培养基上分离的微生物一定是尿素分解菌吗？ 。为什么？ 。 【解析】本题考查培养基的类型、作用等知识。题中所给的KH2PO4、Na2 HPO4、MgSO4·7H2O为无机盐，葡萄糖作为碳源、尿素作为氮源，琼脂作为凝固剂，因此冷却后的培养基为固体培养基；由于培养基中尿素作为唯一氮源，因此可以作为分解尿素的微生物的选择培养基；但是有些微生物可以利用尿素合成其他代谢产物，因此该培养基上培养的微生物并不一定分解尿素。 【答案】（1）葡萄糖 尿素 （2）固体 凝固剂琼脂 （3）有选择作用。此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能够分解尿素的微生物才能生长 （4）不一定。因为有些微生物可以利用尿素分解菌代谢产生的含氮代谢产物生长繁殖。 模拟试题： 1.某化工厂的污水池中，含有一种有害的、难于降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）。实验的主要步骤如下图所示。请分析完成下列问题： （1）培养基中加入化合物A的目的是筛选 ，这种培养基属于 培养基。 （2）“目的菌”生长所需的氮源