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12第一章 概论.ppt

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Figure2. Localization of protoberberine alkaloids in the endodermis and pericycle of Thalictrum flavum roots by epifluorescence and light microscopy. Fresh root segments were cross-sectioned at a thickness of 0.5mm. Panels represent root segments at various stages of development: (A, B) root diameter of ~1mm; (C, D) root diameter of ~4mm; (E) root diameter of ~5mm; and (F–H) root diameter of 6mm. Fixed and embedded root segments were cross-sectioned at a thickness of 3 μm, stained with the periodic acid-Schiff’s procedure, and counterstained with toluidine blue O. Abbreviations: en, endodermis; ep, epidermis; ex, exodermis; pe, pericycle; vc, vascular cambium. All scale bars = 40μm. J. Plant Physiol. 159. 1189-1196 (2002) Figure 3. Localization of protoberberine alkaloids in the pith and cortex of Thalictrum flavum rhizomes by light microscopy. (A) Fresh stem segment,cross-sectioned at a thickness of 0.5 mm, showing localized accumulation of berberine. (B) Fresh stem segment, cross-sectioned at a thickness of ~0.5mm and stained with toluidine blue O. Abbreviations: c, cortex; ph, phloem; pi, pith; px, primary xylem; sx, secondary xylem.Both scale bars = 1mm. J. Plant Physiol. 159. 1189-1196 (2002) 初生木质部 韧皮部 甲苯胺染色 方法:将生物材料在一定的介质中冰冻固化后切片 用途:特别适用于水分多,柔软,而且容易收缩的材料,如动物组织,用滑动切片机或旋转切片机,配上制冷装置。 2.6 冰冻切片法 Leica 冰冻切片机 3.非切片法 不用切片机,不经切片手续而制成切片的方法; 与活体观察法的区别是: 需经过药剂或染色剂的处理,这样组织被杀死后并经染色作成临时或永久制片; 根据材料的性质,采用不同的处理方法; 该类方法操作简单快捷,其中封藏法可使原有组织结构不被破坏,涂片法,压片法弥补了用包埋、切片法所不可能观察清楚的不足。 上列的各类法,又由于处理方法的不同,其中又可分为若干种。我们应该了解各种方法都各有其优缺点,在应用时需相互配合,才能得到制片技术的最佳效果。因此,要根据观察的目的、材料的性质而决定采用何种制片方法。 (1)暂时封藏法 (2)整体封固法 (3)涂片法 (4)压片法 (5)离析法 (6)透明法 非切片法的种类 把活体材料直接放在载玻片上培养,以供暂时的研究和观察之用。 优点: 可使原有组织结构不被破坏 缺点: 水易蒸发,不能长时间保存 方法: A. 简易观察法: 用于淀粉粒、单细胞、原生质体、孢子囊、花粉或丝状体藻类的观察。步骤是把材料放置在载玻片上,加水一滴盖上盖玻片在显微镜下即可观察其生活的情况。 B. 悬滴培养法: 孢子及花粉粒萌发情况的观察 3.1 暂时封藏法 细胞膜的接触:当原生质体置于电导率很低的溶液中时,电场通电后,电流即通过原生质体而不是通过溶液,其结果是原生质体在电场作用下极化而产生偶极子,从而使原生质体紧密接触排列成串; 体细胞融合-电融合的基本过程的观察 简易观察法:观察原生质的运动 简易观察法应用实例 膜的击穿:原生质体成串排列后,立即给予高频直流脉冲可以使原生质膜击穿,从而导致两个紧

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