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氧对微生物的毒害作用: O2+e - 2O2.- +2H+ O2.- O2+H2O2 产生O2.- 、H2O2和OH˙ 2O2.- +H2O2 O2+OH-+ OH˙ 生物如何解除氧毒害? 严格厌氧菌缺乏SOD和过氧化氢酶,故易被生物体内极易产生的自由基毒害致死。 好氧微生物具有氧解毒酶,如过氧化氢酶(Catalase, CAT)、过氧化物酶(Peroxidase,POD )、超氧化物歧化酶( Superoxide Dismutase, SOD)等。 2O2.- +2H+ 好氧菌和耐氧菌 O2+H2O2 SOD 1/2O2+H2O CAT 耐氧菌 POD 2H2O 好氧生物 —— SOD学说 第四节 微生物培养方法(自学) 微生物培养方法 实验室培养法 生产实践中的培养方法 固体培养法 液体培养法 好氧菌的培养:试管斜面、琼脂平板、茄子瓶等。 厌氧菌的培养 高层琼脂柱 厌氧培养皿 亨盖特滚管技术 厌氧罐 厌氧手套箱 厌氧菌的培养 固体培养法 液体培养法 好氧菌的曲法培养 厌氧菌的堆积培养 好氧菌的培养:试管、三角瓶、台式发酵罐 深层通气培养/发酵罐 丙酮丁醇发酵 厌氧手套操作箱 厌氧培养箱 控制有害微生物的措施 杀灭 抑制 消毒 除菌 灭菌 防腐 化疗 杀菌 溶菌 第五节 有害微生物的控制 一、几个基本概念 消毒: 采用较温和的理化因素,仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌,而对被消毒的物体基本无害的措施。 化疗: 即化学治疗。利用具有高度选择毒力(对病原菌具有高度毒力而对宿主无显著毒性)的化学物质来抑制或杀死宿主体内的病原微生物或病变细胞,以达到治疗疾病的一种措施。 灭菌: 采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施,实质上可分杀菌和溶菌两种,前者指菌体虽死,但形体尚存,后者则指菌体杀死后,其细胞发生溶化、消失的现象。 防腐: 利用某种理化因素,完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,从而达到防止食品等发生霉腐的措施。 低 温 缺 氧 干 燥 高 渗 高 酸 度 高 醇 度 加防 腐剂 理化因子对微生物是起抑制作用还是杀灭作用,并没有被很严格的分开。 二、控制微生物的物理因素 高温灭菌 辐射作用 过滤作用 高渗作用 超声波 (一)物理灭菌因素-高温 火焰灼烧法 烘箱热空气灭菌法 干热灭菌法 煮沸消毒法 巴氏消毒法 间歇灭菌法 高压蒸汽灭菌法 湿热灭菌(消毒)法 高温灭菌(消毒)法 LTH(63℃,30m) HTST(70℃,15s) UTP(137~141℃,1~3s) 湿热的灭菌条件: 多数细菌和真菌的营养细胞:60℃左右处理5-10min; 酵母菌和真菌的孢子:80℃才能被杀死; 细菌的芽孢:121℃处理15min; 在相同温度下,湿热的效力比干热灭菌好。 ① 蛋白质凝固所需的温度与其含水量有关,含水量愈大,发生凝固所需的温度愈低。湿热灭菌的菌体蛋白质吸收水分,所以较同一温度的干热空气中易于凝固。 ② 湿热的穿透力比干热大,使其深部也能达到灭菌温度,故湿热比干热收效好一些。 ③ 湿热灭菌过程中蒸汽放出大量潜热,能迅速提高被灭菌物品的温度。 (二)辐射作用 辐射灭菌(Radiation Sterilization)是利用电磁辐射产生的电磁波 杀死大多数物质表面或内部微生物的一种有效方法。 用于灭菌的电磁波有微波,紫外线(UV)、X-射线和γ-射线等 (三)过滤除菌 空气和不耐热的液体培养基的灭菌 采用比细菌小的筛子或滤膜作各种过滤器,当空气或液体流经筛子或滤膜时,微生物不能通过滤孔而被阻留在一侧,从而达到灭菌的目的。 二、控制微生物的化学因素 表面消毒剂 化学因素 化学治疗剂 抗代谢物 抗生素 生物药物素 选择性 无选择性 防腐剂 消毒剂 表面消毒剂:能够杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质。一般没有选择性,对一切活的细胞都有毒性,不能用作活细胞或机体内治疗。 化学治疗剂;特异性地作用于某些微生物并具有选择毒性的化学物质。 (一)表面消毒剂 酸类:醋酸熏蒸消毒 酚类:石炭酸 重金属极其盐类:升汞、红汞 有机化合物 :醇、醛、酚 氧化剂:高锰酸钾、双氧水 卤素:氯,碘 染色剂:龙胆紫 表面活性剂:新洁尔灭 气体:环氧乙烷 临床上最早使用的的消毒剂——石炭酸 石炭酸系数:指在一定时间内被试药剂能杀死全部供试菌的最高稀释度和达到同效的石炭酸的最高稀释度的比率。一般规定处理时间为10分钟,供试菌定为Salmonella typhi(伤寒沙门氏菌)。 (二)抗代谢物(antimetabolite) 一类在化学结构上与细胞内必需代谢物的结构类似,并可干扰正常代谢活动的化学物质。也称代谢类似物(metabolite an
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