细胞工程-植物细胞融合技术解析.ppt

---植物细胞融合技术 什么是植物细胞融合技术 植物细胞融合是指用酶脱除细胞壁的方法将不同植物的细胞融合，并培养出了再生植株的生物技术。 植物细胞融合技术的理论基础 1,细胞全能性 2,细胞膜的流动性 一、仙台病毒法 仙台病毒诱导细胞融合经四个阶段： ①两种细胞在一起培养，加入病毒，在4℃条件下病毒附着在细胞 膜上。并使两细胞相互凝聚； ②在37℃中，病毒与细胞膜发生反应，细胞膜受到破环，此时需 要Ca2+和Mg2+，最适PH为8.0一8.2； ②细胞膜连接部穿通，周边连接部修复，此时需Ca2+和ATP； ④融合成巨大细胞，仍需ATP 。 植物原生质体融合技术 病毒促使细胞融合的主要步骤如下： 两个原生质体或细胞在病毒黏结作用下彼此靠近； 通过病毒与原生质体或细胞膜的作用使两个细胞膜间互相渗透，胞质互相渗透； 两个原生质体的细胞核互相融合，两个细胞融为一体； 进入正常的细胞分裂途径，分裂成含有两种染色体的杂种细胞。 用灭活的病毒诱导的动物细胞融合过程示意图 PEG原理 减少细胞间的游离水，促使 细胞靠近并破坏细胞磷脂双分子层，改变膜结构，细胞相互接触并容易结合在一起 电融合原理 高压电导致细胞产生可融合的穿孔 二.其实,植物细胞融合 采用PEG法和电融合法比较适用 聚乙二醇（PEG）法细胞融合过程 电融合诱导法原理示意图 融合的方式 三 植物融合子的鉴定 融合