第四章细胞质膜及其表面-细胞生物学辩析.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 整合蛋白为跨膜蛋白（transmembrane proteins），两性分子。跨膜结构域为1至多个疏水的α螺旋。与膜的结合紧密，只有用去垢剂才能从膜上洗涤下来。 外周蛋白靠离子键或其它较弱的键与膜表面蛋白或脂分子结合，改变溶液的离子强度、提高温度就可以从膜上分离下来。 脂锚定蛋白分为三类： 1）脂肪酸结合到膜蛋白N端的甘氨酸残疾上。 2）脂锚定蛋白与插入质膜内通过半胱氨酸残基与小叶的长碳烃链链结合。 3）糖磷脂酰肌醇 GPI 连接的蛋白位于细胞膜的外小叶，用磷脂酶C处理细胞，能释放出结合蛋白。许多细胞表面的受体、酶、细胞粘附分子和PrPC都是这类蛋白。 ①,② integral protein； ③,④ lipid-anchored protein ； ⑤,⑥ peripheral protein 内在膜蛋白与膜脂结合的方式 1、跨膜结构域 1 单次跨膜—α螺旋 ，20个左右的氨基酸残基 （2）跨膜亲水通道—多个α螺旋 （3）跨膜亲水通道—多个β折叠片 β折叠桶 2、跨膜结构域两端携带的氨基酸残基与磷脂分子极性头部的相互作用 3、膜蛋白通过半胱氨酸上共价结合的脂肪酸分子插入到脂双层之间 4、少数蛋白与糖脂共价结合 （三）去垢剂（detergent）—两性小分子 离子型去垢剂 SDS 非离子型去垢剂Triton X-100 去垢剂溶解膜蛋白 第二节生物膜基本特征与功能（一）质膜的流动性 膜脂和蛋白质的分子运动组成。 1、膜脂分子的运动 ①侧向扩散运动；②旋转运动；③摆动运动 ④伸缩震荡运动；⑤翻转运动；⑥旋转异构化运动。 影响膜脂流动性的因素: 1 胆固醇：胆固醇分子短而具有刚性,含量增加会降低膜的流动性。 2 脂肪酸链的饱和度：不饱和脂肪酸链在双键处产生纽结，使尾部难聚集,膜流动性增加 3 脂肪酸链的链长：短链减少了烃尾相互作用的机会,增加膜的流动性 4 卵磷脂/鞘磷脂：该比例高则膜流动性增加，是因为鞘磷脂粘度高于卵磷脂。 5 其他因素：膜蛋白和膜脂的结合方式、温度、酸碱度、离子强度等。 （二）膜蛋白的流动性 1、荧光抗体免疫标记实验（细胞融合技术 ） 2、成斑现象或成帽现象 3、荧光漂白恢复技术 4、膜蛋白流动性的限制因素 细胞骨架的影响 细胞之间的连接 膜流动性的生理意义 当膜的流动性低于一定的阈值时，许多酶的活动和跨膜运输将停止，反之如果流动性过高，又会造成膜的溶解。 二、质膜的不对称性 ——质膜内外两层的组分和功能有明显的差异 （一）、质膜各部分的名称 细胞外 细胞质基质 样品经冰冻断裂处理后，各断面命名为： ES 细胞外表面； EF 细胞外小页断裂面； PS 原生质表面； PF 原生质小页断面。 （二）、膜脂的不对称性——同一种膜脂分子在双层中不均匀分布 （三）、膜蛋白的不对称性 ——每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有明确的方向性和分布的区域性 复合糖的不对称性：糖脂和糖蛋白只分布于细胞膜的外表面。 三、细胞质膜的基本功能 三、细胞膜的功能 保护； 运输； 通信； 提供酶结合位点； 介导细胞连接； 形成细胞表面的特化结构。 第三节 膜骨架 质膜下纤维蛋白组成的网架结构；位于质膜下约0.2μm厚的溶胶层。 主要作用：维持质膜的形态。 模式材料： 二、红细胞的的生物学特性: 电子显微镜下的红细胞 血影（ghost）: 红细胞，经低渗处理破裂释放出内容物，留下一个保持原形的空壳，称为血影。 红细胞血影及封闭、未封闭小泡的形成 人红细胞膜蛋白SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分部 经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析，血影成分主要有： 血影蛋白：由结构相似的α链、β链组成异二聚体，两个二聚体头与头相接连形成四聚体。 锚蛋白（ankyrin）：与血影蛋白和带3蛋白的胞质部相连，将血影蛋白网络连接到质膜上。 带三蛋白：阴离子载体，通过交换Cl－，使HCO 3 －进入红细胞。为二聚体，每个单体跨膜12次。 血型糖蛋白：单次跨膜糖蛋白，功能尚不明确，与MN血型有关，与带4.1蛋白相连。 三、红细胞质膜蛋白及膜骨架 1.质膜蛋白:带3蛋白（band 3） 、血型糖蛋白（glycophorin） 2.膜骨架主要成分:血影蛋白（spectrin） 、肌动蛋白（actin） 3.连接蛋白：锚蛋白（ankyrin） 、带4.1蛋白（band 4.1） * 第四章 细胞质膜 本章内容提要 第一节 质膜的结构模型与基本成分 一、生物膜的结构模型 二、膜脂 三、膜蛋白 第二节 生物膜基本特征与功能 一、流动性 二、不对称性 三、细胞质膜的基本功能 第三节 膜骨架 一、膜骨架 二、红细胞的