单菌落PCR在发夹RNA重组克隆鉴定中的应用.docVIP

单菌落PCR在发夹RNA重组克隆鉴定中的应用 　　摘要：以单菌落为模板进行PCR扩增，直接筛选插有发夹RNA（Small hairpin RNA，shRNA）干扰片段的重组阳性克隆。以圆滑单菌落为PCR模板，采用载体通用引物直接扩增目的片段，质粒测序验证 PCR结果的正确性。结果表明，在筛选的6个菌落中均扩增出324 bp的目的条带，进一步进行测序分析鉴定，证实了菌落PCR阳性克隆含有发夹RNA干扰片段。单菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效筛选重组阳性克隆的方法。 　　关键词：单菌落PCR；重组克隆；发夹RNA 　　中图分类号：Q781；S961.6 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2014）01-0220-02 　　Application of Individual Bacterial Colonies PCR in Screening 　　shRNA Recombinant Clone 　　LI Xu-yan，YUN Dong-ze，SHAO Shu-li 　　（College of Life Science and Agro-forestry， Qiqihar University， Qiqihar 161006， Heilongjiang， China） 　　Abstract： The individual bacterial co