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专题2 《细胞工程 》 6-2 克隆技术 高考考纲要求: (1)植物的组织培养Ⅱ (2)动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ (3)细胞融合与单克隆抗体Ⅱ 什么是克隆(Clone)? 克隆,就是无性繁殖系。 个体通过无性繁殖可连续传代并形成群体,这样的群体称为无性繁殖系,即克隆。 分子水平:基因克隆 细胞水平:组织培养技术 细胞融合技术 细胞核移植技术 个体水平:生物的无性生殖 细胞工程 在不同水平上的克隆: 2001年3月,国家“863”计划成果展览会上展出了一只背上长有人耳的老鼠,这是克隆技术继“多利”羊之后的一次飞跃发展,下列不属于克隆技术的是 A.一小块胡萝卜经组织培养,发育成完整的胡萝卜植株B.将人的DNA片段移植入细菌体后,获得大量的人的 DNA片段C.农业生产上利用马铃薯的芽繁殖马铃薯D.小麦的花药经离体培养发育成单倍体植株 D 植物的克隆 植物组织培养技术 植物 体细胞杂交技术 一、植物组织培养 1、原理: 细胞的全能性 二植物细胞工程的基本技术 一)细胞的全能性 1、概念:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能。 2、原因:受精卵 有丝分裂 体细胞 含全套遗传基因 3、全能性的程度 (1) 受精卵的全能性最高 受精卵 生殖细胞 体细胞 > > (2) 植物细胞>动物细胞 (3) 4、形成不同组织、器官原因: 基因选择性表达 5、条件: (1)离体状态, (2)完全营养物质、激素 离体的植物器官或组织或细胞(外植体) 愈伤组织 脱分化 胚状体或丛芽 植物幼体 继续分裂和分化 一棵完整的植株 细胞分裂和再分化 需要适宜的环境条件 ①适宜温度、 pH和无菌环境。 ②无机、有机成分和植物激素(生长素、细胞分裂素) 分化程度低去分化较易 光照问题: 形成愈伤组织不需要光照而愈伤组织的再分化需要光照 愈伤组织细胞中有叶绿体吗? 适当调整植物激素的比例 生长素与细胞分裂素的浓度及其比例不同调控脱分化和根与芽的再分化 离体的植物器官或组织或细胞(外植体) 愈伤组织 脱分化 胚状体或丛芽 植物幼体 继续分裂和分化 一棵完整的植株 细胞分裂和再分化 三植物组织培养技术 重点 理解 1、概念: 在无菌和人工控制条件下,将离体的植物器官、组织、细胞,培养在人工配制的培养基上,给予适宜的培养条件,诱导其产生愈伤组织、丛芽,最终形成完整的植株。 2、原理:植物细胞的全能性 3、过程: 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 再分化 脱分化 也叫:外植体 如:茎尖、根尖 适宜的温度、PH值、 养料、激素、充足氧气 条件 避光 需光 特点:具分裂、分化能力,既具全能性(主要) 无定形状态、高度液泡化、排列疏松、无规则、 无叶绿体,不进行光合作用 花药 组织培养 花粉细胞培养 脱分化 愈伤组织 再分化 分化出小植物 移栽 单倍体小植株 染色体加倍 正常植株 设计一种植物花药组织培养和染色体加倍的实验流程: 原生质体 番茄细胞 原生质体融合 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 愈伤组织 杂种植株 再分化 四、植物体细胞杂交技术(重点 理解): 1、过程: 马铃薯细胞 标志:成功融合 人工诱导 去壁 植物组织培养 植物细胞的融合 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 植物A细胞 植物B细胞 去壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 融合体 再生壁 杂种细胞 细胞分裂 愈伤组织 杂种植株 去壁的常用方法: 酶解法(纤维素酶、果胶酶等) 原生质体融合方法: 物理法:离心、振动、电刺激等 化学法:聚乙二醇(PEG) 植物体细胞杂交过程示意图 细胞融合的基础: 细胞膜的流动性 将不同种的植物体细胞,在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。 4、优势:(与有性杂交方法比较) 克服植物远缘杂交不亲和性 3、原理: 细胞膜的流动性和细胞全能性 主要:原生质体融合 结果 2、概念: 四、植物体细胞杂交技术(重点 理解): 如小麦和玉米之间存在生殖隔离 白菜-甘蓝 白菜 甘蓝 5、实例: 生长期短、耐热性强和易于贮藏 番茄-马铃薯 5.植物细胞工程的实际应用 1 植物繁殖的新途径 10新课标理综 请回答: (1)植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ,繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养,最终能够形成完整的植株,说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。 (2)把试管苗转接到新的培养基上时,需要在超净工作台上进行,其原因是避免 的污染。 (3)微型繁殖过程中,适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ,而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长,促进愈伤组织产生和生长,需要使
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