第七章原核生物基因表达调控-分子生物学解析.ppt

第7章原核生物的基因调控 一、绪论 原核生物和单细胞真核生物直接暴露在变幻莫测的环境中，食物供应毫无保障，只有能根据环境条件的改变合成各种不同的蛋白质，使代谢过程适应环境的变化，才能维持自身的生存和繁衍。 假如在大肠杆菌内，平均一个基因1000bp，一个细胞中约有2500-3000个基因。正常情况下，可带有107个蛋白质，平均每个基因产生3000多个蛋白质分子。 但实验却表明，每细胞中有些蛋白质少至10个分子，而有一些却多达500000个分子。 一个大肠杆菌中只有15个分子的β－半乳糖苷酶，若将细胞培养在只含乳糖的培养基中，每细胞中酶量可高达几万个分子，其合成的速度和总量随环境的变化而改变。 表明基因的表达受到调控。 细菌在进行调控时： 一个体系在需要时被打开，不需要时被关闭。这种“开-关”（on-off）活性是通过调节转录来建立的，也就是说mRNA的合成是可以被调节的。 1、基因表达及基因表达调控 是指生物体基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录及翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定生物学功能的全过程,称为基因表达（gene expression）。 对这个过程的调节就称为基因表达调控（gene regulation或gene control）。 基因表达调控主要表现在以下几个方面： ① 转录水平上的调控(transcriptional regulation)； ② mRNA加工成熟水平上的调控(differential processing of RNA transcript)； ③ 翻译水平上的调控(differential translation of mRNA)。 3、基因表达的调控方式 负调控（negative transcription regulation）: 调控蛋白+DNA序列 基因表达(相应蛋白质降低) 正调控（positive transcription regulation）: 调控蛋白+DNA序列 基因表达 (相应蛋白质增加) 负调控 一）乳糖操纵子(lactose operon) 1、乳糖操纵子的发现： 葡萄糖充分时： 葡萄糖代谢有关的酶基因---表达 其他糖代谢有关的酶基因---关闭 葡萄糖耗尽时,乳糖存在： 乳糖代谢有关的酶基因 ---表达 葡萄糖代谢有关的酶基因---关闭 说明酶可以诱导 乳糖的利用及其相关的酶: 乳糖 (在通透酶作用下进入细菌） 别位乳糖 葡萄糖+半乳糖 安慰诱导物（gratuitous inducer） 2、结构基因顺序 乳糖操纵子包括三个结构基因：Z、Y、A A 模型的提出 1940年，Monod发现细菌“二次生长曲线”； 1950年，Monod和Tacob发现两对基因Z和I； Szilard发现I基因决定阻遏物的合成； Jocob提出结构基因旁边还有开关基因，即操纵基因。 J.Lederberg 1948 不同Lac-突变型 细菌结合转移和转导试验 证明三基因紧密连锁 Z编码β-半乳糖苷酶；Y编码β-半乳糖苷透过酶；A编码β-半乳糖苷乙酰基转移酶。 β-半乳糖苷酶是一种β-半乳糖苷键的专一性酶，除能将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖外，还能水解其他β-半乳糖苷（如苯基半乳糖苷）。 β-半乳糖苷透过酶的作用是使外界的β-半乳糖苷（如乳糖）能透过大肠杆菌细胞壁和原生质膜进入细胞内。 β-半乳糖苷乙酰基转移酶的作用是把乙酰辅酶A上的乙酰基转到β-半乳糖苷上，形成乙酰半乳糖。 在这些突变体中，有一类突变体，它体内的半乳糖苷酶的形成不依赖于诱导