浅谈如何用色谱荧光法检测烟气中的挥发酚成分.docVIP

浅谈如何用色谱荧光法检测烟气中的挥发酚成分 [摘 要]建立了快速测定卷烟主流烟气中（邻、间、对）-苯二酚、（邻、间、对）-甲基苯酚和苯酚的超高效液相色谱荧光检测法（UPLC-FLR）.采用 1%的醋酸水溶液对剑桥滤片进行超声提取后，经0.2μm 滤膜过滤直接进行 UPLC分析.利用FLR检测器分别对7种挥发酚进行定性定量，且（间、对）甲基苯酚可以完全分开.该法检测卷烟主流烟气中挥发酚相对标准偏差为0.73%～4.62%，回收率为 86.62%～96.88%.方法具有前处理简便、分析时间短、重现性好等优点，适合卷烟主流烟气中酚类物质的批量快速检测. [关键词]UPLC-FLR； 主流烟气； 挥发酚 中图分类号：TU834.6+34 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2015）21-0115-01 挥发酚是卷烟主流烟气中重要的有害成分，被列入加拿大政府46 种有害成分名单和 WHO“烟草制品管制研究小组”建议的管制成分清单.因此对卷烟主流烟气中挥发酚进行研究，对于了解烟叶香气质量和指导卷烟配方具有重要意义，并为卷烟减害降焦、烟草制品质量控制及中式卷烟的开发提供理论依据.挥发酚检测目前主要是高效液相色谱法，因其不需要样品预分离和衍生化，具有操作简单、可直接进行样品测定等优点，在酚类化合物的分析中得到了广泛的应用.使用液相色谱可在常温下进行测定，具有很高的灵敏度和精密度，但以往的方法前处理较复杂，分析时间较长，且无法分开（ 间、对） 甲酚，只能合并定量.本文利用UPLC FLR同时测定主流烟气中的（ 邻、间、对）-苯二酚、（ 邻、间、对）-甲基苯酚和苯酚，对7 种化合物分别定性定量.方法具有前处理简便、分析时间短、重现性好等优点. 1 实验部分 1.1 主要仪器和试剂 仪器为美国 Waters 公司Acquity 超高效液相系统，带有二元高压梯度泵、自动进样器、柱温箱和荧光检测器，以及 Waters Em-power 2.0 数据处理工作站.BS224S 电子分析天平（感量：0.1 mg），JHN-2型超声波清洗器，MILLI- Q超纯水制备仪（美国 MILLIPORE 公司）.甲醇（色谱纯试剂，Fisher 公司），醋酸（ AR，上海化学试剂有限公司），去离子水（电阻率≥18 MΩ?cm）.（邻、间、对）-苯二酚（标样，Supelco 公司）.（邻、间、对）-甲酚和苯酚（标样，Dr.Ehrenstorfe GmbH公司）质量分数 99.5%. 1.2 色谱条件 KinetexTM PFP（propyl-linkedpentafluorphenyl） 液相色谱柱 （ 2.6 μm，50 mm×2.1 mm） ，流动相为甲醇（A）和1% 醋酸水溶液（B），采用多级线性梯度洗脱程序，流速为0.5 mL/min，柱温为30 ℃，进样体积2 μL，. 1.3 标准溶液的配制 称取邻、对-苯二酚，苯酚，邻、对-甲基苯酚各 100 mg，间-苯二酚、间 -甲基苯酚 20 mg 分别于烧杯中，加适量甲醇溶解后转移至 100 mL 容量瓶中，用甲醇溶解定容，作为标准储备液.存放在 4 ℃冰箱中.取以上储备液各 2 mL 于 25 mL 容量瓶中混合，用甲醇定容，作为一级储备液.取一级储备液5，2，1，0.2，0.1 mL 分别于 10 mL 容量瓶中，用甲醇定容，存放在 4 ℃冰箱中. 1.4 烟丝的样品前处理 将卷烟样品在（22±1）℃和相对湿度60%±2%条件下平衡48 h，用吸烟机按规定的标准条件抽吸卷烟，用92 mm剑桥滤片捕集20支卷烟的主流烟气，吸毕，取出滤片.将1张捕集烟气粒相物的剑桥滤片折叠放入250mL锥形瓶中，准确加入40mL1%的醋酸水溶液，室温下超声萃取20 min，静置5 min，萃取液经0.2μm滤膜过滤，立即检测. 2 结果与讨论 2.1 色谱分离条件选择 2.1.1 样品处理条件选择 据文献报道，在一定时间内可将主流烟气总粒相中挥发酚萃取完全，更长的萃取时间会因温度升高而导致挥发酚氧化损失.经过实验发现，20 min 即可以保证萃取完全，更长的时间挥发酚检测值会变小，因此挥发酚萃取时间选择20 min. 2.1.2 流动相的选择 用水/甲醇作流动相时酚羟基易产生电离，峰拖尾严重.用水/乙腈作流动相时，间、对甲酚无法分开.而用醋酸水溶液/甲醇作流动相可抑制酚酸的电离，形成疏水缔合物，使分离效果和峰形得到较大改善，因此选择 1% 醋酸水溶液/甲醇为流动相.根据 7 个组分的极性差别，采用等度洗脱难以实现各组分完全分离.经反复试验，最后确定流动相的梯度洗脱。 2.1.3 测定波长的选择 样品荧光最佳激发波长一般相当于其最大紫外吸收波长，而对于多组分检测，将激发波长固定在 250～350 nm间任意波长上，改变发