高中生物选修三知识点辩析.doc

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专题1 基因工程 基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。 (一)基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶) (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。 2.“分子缝合针”——DNA连接酶 (1)两种DNA连接酶(DNA连接酶和DNA连接酶)的比较: ①相同点:都缝合磷酸二酯键。 ②区别:E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低。。 与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”——载体 (1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。 ②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。 ③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 (2)最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。 (3)其它载体: 入噬菌体的衍生物、动植物病毒 4.在进行基因工程操作中,真正被用作载体的质粒,都是在天然质粒的基础上进行过人工改选的。 基因工程的基本操作程序 第一步:目的基因的获取 目的基因是指: 主要是指编码蛋白质的基因 ,也可以是一些具有调控作用的因子 (2)获取目的基因的 感受态细胞 ,再将 重组表达载体DNA分子 溶于缓冲液中与感受态细胞混合,在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子,完成转化过程 专题2 细胞工程 细胞工程:是指导应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法,通过细胞水平或细胞器水平上的操作,按照人的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术, (一)植物细胞工程 1.理论基础(原理):细胞全能性(分化的细胞,仍具有形成完整植株所需要的全部遗传信息) 全能性表达的难易程度:受精卵>生殖细胞>干细胞>体细胞;植物细胞>动物细胞 植物全能性表达的条件:离体的,提供人为条件(营养,激素,适宜的外界条件) 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞 2.植物组织培养技术 (1)过程: (2)用途:微型繁殖、作物脱毒、制造人工种子、单倍体育种、细胞产物的工厂化生产。 (3)地位:是培育转基因植物、植物体细胞杂交培育植物新品种的最后一道工序。 3.植物体细胞杂交技术 (1)过程: (2)诱导融合的方法:物理法包括离心、振动、电刺激等。化学法一般是用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂。 (3)去细胞壁:纤维素酶和果胶酶 等到杂种细胞再生出细胞壁即细胞杂交结束, 意义:克服了远缘杂交不亲和的障碍。打破物种之间的生殖隔离,扩大遗传重组范围。 微型繁殖的优点:可以保持优良品种的遗传特性,可以高效快速地实验种苗的大量繁殖 人工种子的优点:无性繁殖,完全保持优良品种的遗传特性,不受季节限制,方便运输及贮藏 单倍体育种的优点:极大缩短了育种的年限,节约了大量的人力物力。 (二)动物细胞工程 常用的技术手段:动物细胞培养,动物细胞核移植,动物细胞融合,生产单克隆抗体。其中动物细胞培养技术是基础技术 1. 动物细胞培养 (1)概念:动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和繁殖。 (2)动物细胞培养的流程:取动物组织块(动物胚胎或幼龄动物的器官或组织)→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 (3)细胞贴壁和接触抑制:悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁(2)选用去核卵(母)细胞的原因:卵(母)细胞比较大,容易操作;卵(母)细胞细胞质多,营养丰富,细胞质中含促进细胞核全能性表达的物质 (3)体细胞核移植的大致过程是: (4)体细胞核移植技术的应用: ①加速家畜遗传改良进程,促进良畜群繁育; ②保护濒危物种,增大存活数量; ③生产珍贵的医用蛋白;

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