仪器分析课件剖析.docVIP

化验工培训教材 一、吸光光度法 定义：吸光光度法是采用分光器（棱镜或光栅）获得纯度较高的单色光，是基于物质对单色光的选择性吸收测定物质组分的分析方法。（吸光光度法就是基于这种物质对电磁辐射的选择性吸收的特性而建立起来的，它属于分子吸收光谱。） 特点：吸光光度法具有灵敏度高、准确度和稳定性较好、适用范围广、所需仪器简单价廉等优点。它通常用于微量组分的测定，是业内广泛采用的分析手段。 1.1 紫外与可见光吸收光谱的形成 原子或分子中的电子，总是处在某一种运动状态之中。每一种状态都具有一定的能量，属于一定的能级，这些电子由于各种原因（如受光、热、电）的激发，从一个能级转到另一个能级，称为跃迁。 当这些电子吸收了外来辐射的能量从一个能量较低的能级跃迁到一个能量较高的能级时都对应着吸收一定的能量辐射，具有不同分子结构的各种物质，有对电磁辐射显示选择吸收的特性，正像我们在光度分析中经常见到的，有色物质的溶液对不同波长的入射光线有不同程度的吸收。 吸光光度法就是基于这种物质对电磁辐射的选择性吸收的特性而建立起来的，它属于分子吸收光谱。分子吸收光谱形成中所吸收的能量与电磁辐射的频率成正比。 1.2 吸光光度法的基本原理 朗伯-比尔定律 有色溶液对光的吸收程度，与该溶液的液层厚度、浓度以及入射光的强度等因素有关。如果保持入射光的强度不变，则光吸收程度与液层厚度及溶液的浓度有关，其定量关系式为： A