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主要内容 摘要 前言 实验部分 结论 1、摘要 一种新的紫杉醇前药，由单萜烯单元与紫杉醇2位的羟基耦合而成。使用角鲨烯衍生的聚乙二醇（SQ-PEG）作为表面活性剂，在水中与PtxMIP自组装形成纳米粒，载药率可达到82%。通过生物成像技术对细胞生长进行评估，同时用来监测动物体内肿瘤的转移情况。结果显示，PtxMIP_SQ-PEG治疗后肿瘤转移的速度明显减慢，而且比游离的药物具有更好的耐受性，从而表明这种新颖的改进萜烯类纳米自组装的前药具有良好的前景。 附： SQ：角鲨烯,具有提高体内超氧化物歧化酶(SOD)活性、增强机体免疫能力、改善性功能、抗衰老、抗疲劳、抗肿瘤等多种生理功能，是一种无毒性的具有防病治病作用的海洋生物活性物质。 MIP：单帖烯单元，以两个异戊二烯单位，“头尾”相连接而成的2,6-二甲基辛烷为基本骨架；具有皮肤渗透性（易穿透皮肤）、刺激免疫系统、消毒作用（清洁、杀菌）、易挥发、氧化后对皮肤有刺激性。 2、前言 紫杉醇的简介 紫杉醇(Ptx)是一种天然的二萜生物碱，紫杉醇是新型抗微管药物,通过促进微管蛋白聚合抑制解聚,保持微管蛋白稳定,抑制细胞有丝分裂；还具有显著的放射增敏作用（使细胞中止于对放疗敏感的G2和M期）；虽然紫杉醇的抗癌效果较好，但因为水溶性差限制了它的应用。 现存有关剂型的不足 临床上使用的紫杉醇制剂为聚氧乙烯蓖麻油和乙醇混合制成的乳化剂，静脉注射前，用5%的生理盐水稀释；因为具有絮凝的趋势，所以只能在短时间具有稳定性。而且这种传统的非离子质的乳化剂发现曾有过敏反应，血液毒性，外周神经毒性和神经病变等不良反应。即使与糖皮质激素和抗组胺药进行术前用药也会有1-3%的不良反应发生。此外，聚氧乙烯蓖麻油微球，降低了药物的游离分数，也可能会妨碍药物对组织的渗透等问题。 研究近况 鉴于以上的问题，尝试着开发出一种合适的剂型，来克服PTX静脉注射时聚氧乙烯蓖麻油毒性的相关问题。首先，出现了各种PTX纳米级制剂，包括乳剂，脂质体，胶束和树枝状聚合物等。（其中，白蛋白结合PTX的纳米颗粒（Abraxane）相比传统的泰素具有更优良的药代动力学和更好的治疗效果，被FDA批准用于治疗化疗失败的转移性乳腺癌。另一个配方，Genexol-PM，紫杉醇的一种聚合物胶束，目前正在进行二期临床试验，并且显示出了可喜的成果。) 然而，载药率较低、药物突释的问题仍然存在。为此提出设计成一种水溶性衍生物前药，微管蛋白与C2′结合后会降低自身的活性，因此需要通过耦合氨基、羧酸、磺酸盐、磷酸盐、或糖衍生品等基团来提高其活性；为了将紫杉醇选择性的靶向至肿瘤组织，将其设计成一种脂肪酸衍生物（DHA-PTX,三期临床试验转移性黑色素瘤正在进行）。虽然他比泰素有更高的耐受计量但其配方中仍含有10%的聚氧乙烯蓖麻油，因此也可能会产生一些毒性问题。 本文研究内容 综上所述，本文开发设计出了一种不含有聚氧乙烯蓖麻油的配方，即用紫杉醇结合SQ；但是，结果显示其抗癌活性明显小于游离药物。查阅资料，决定在PTX和SQ之间引入一个二烯结构的化合物来在改善细胞毒性的同时增加药物的治疗指数。（有篇文献报道，一种以吉西他滨为模型的抗癌药物就引入了异戊二烯单元的结构来进行这方面的研究）；之后对患有胰腺癌的小鼠治疗成效显著，证明了这种方法的可行性。因此设计了本文这种药物传递的模型PTX-MIP-SQ-PEG。 3、实验部分 ①SQ-PEG的合成 文献中没有合成步骤，具体方法见参考文献74 ②5-甲基-己-4-烯酸的合成（3） 将1ml丙酸溶于200ml乙酸三甲酯，然后与20.5g2-甲基-3-丁烯-2-醇混合加热，140℃反应4h。反应液缓慢加入300ml1M冷盐酸中，然后用100ml乙酸乙酯萃取三次。用碳酸氢钠水溶液洗涤有机相，然后用无水硫酸镁除去水分，减压蒸馏得5-甲基己基-4烯酸甲酯。将所得到的酯溶于150ml的甲醇中，然后加入50ml3M的NaOH，搅拌回流1h。减压蒸馏后用6M盐酸调PH至2。混合物用乙醚进行萃取，有机相用硫酸镁干燥，减压蒸馏得黄色油状物3 ③ PtxMIP的合成（2紫杉醇与单帖烯单元共轭体的合成） 将PTX溶于无水二氯甲烷，冰浴下依次加入3，DMAP,DCC，冰浴搅拌2h，然后室温搅拌3h。抽率，并用二氯甲烷洗涤沉淀。将滤液减压浓缩并将残余物过柱纯化，用乙酸乙酯/石油醚，1:2洗脱，得到白色固体。?20 °C，用乙醚重结晶，得白色蓬松固体2。 3.2 PtxMIP_SQ-PEG NPs的制备 MTT法：细胞毒性实验采用了MiaPaCa-2, A549和 MCF7这三种癌细胞，用游离的紫杉醇做对照，测得游离紫