分子印迹固相萃取液相色谱质谱法测定果蔬中20种三唑类农药残留.docVIP

分子印迹固相萃取液相色谱质谱法测定果蔬中20种三唑类农药残留 　　摘 要 以三唑酮为模板分子，三氟甲基丙烯酸为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，合成了对三唑类农药具有高选择性的分子印迹聚合物。将印迹聚合物作为固相萃取填料，优化分离、富集三唑类农药的最优上样、淋洗和洗脱条件。结合液相色谱串联质谱法，实现了果蔬样品中20种三唑类杀菌剂的高通量特异性检测。对样品前处理过程中的加标回收率进行了考察，并对比了分子印迹固相萃取和ENVICarb/SPE小柱的基质效应。结果表明：在1.0， 2.0 和10.0 μg/kg加标水平下，三唑类农药的回收率在 81.0%～109.7% 之间，相对标准偏差小于12.6%，基质效应在 91.1%～121.8%之间。方法灵敏、准确度高，与ENVICarb/SPE 小柱相比，能更有效减弱基体效应。 　　关键词 分子印迹聚合物； 固相萃取； 三唑类农药 　　1 引 言 　　三唑类杀菌剂是指含有1，2，4三唑环的化合物，由于具有低毒、内吸性强、持效期长等优点，被广泛应用于水果、蔬菜、稻谷等病虫害的防治 [1～3 ]。随着三唑类农药的广泛应用，其在农产品和环境中的残留问题，也逐渐引起人们的重视。对其在食品和环境中的残留分析需要从复杂的基质样品中将低浓度的目标化合物高效提取和净化，因此对样品前处理提出较高要求。而传统上广泛使用的固相萃取技术特异性不强，常发生杂质共萃取现象 [4，5 ]。因此亟待开发一种快速、灵敏、特异的检测技术。 　　分子印迹聚合物（MIPs）能够选择性提取复杂样品中的目标分子或与目标分子结构相似的化合物， 适合作为固相萃取的材料 [6～8 ]。与传统的固相萃取柱相比，分子印迹固相萃取（MISPE）克服了试样体系复杂、预处理繁琐等不利因素，提高了分析准确性，更适用于痕量分析 [9～12 ]。三唑类化合物的MISPE方法已有少量文献报道，彭畅等 [13 ]采用邻硝基苯酚为替代模板，4乙烯基吡啶为功能单体，合成了对7种三唑类化合物具有特异性吸附的印迹聚合物，并应用于土壤样品的分析中。 　　本研究以三唑酮为模板分子，三氟甲基丙烯酸为功能单体，合成了对20种三唑类农药具有高选择性的MIP材料。MISPE结合液相色谱串联质谱法，实现了果蔬样品中三唑类杀菌剂残留的特异性分离富集和检测，方法快速、灵敏、准确度高，与现有SPE技术相比，有效降低了样品基质效应。 　　2 实验部分 　　2.1 试剂与仪器 　　Agilent 1200液相色谱仪（美国Agilent公司），API 4000液相色谱串联质谱仪（美国Applied Biosystems公司）；E811全自动索氏提取仪（瑞士Buchi公司）。 　　三唑酮等农药标准品（Dr. Ehrenstorfer公司）；三氟甲基丙烯酸（Trifluoromethyl acrylic acid， TFMAA），乙二醇二甲基丙烯酸酯（Ethyleneglycol dimethacrylate， Egdma），均为分析纯（SigmaAldrich公司），使用前纯化；偶氮二异丁腈 （Azobisisbutyronitrile， AIBN，化学纯，上海试剂四厂）；乙酸（分析纯，国药集团）；乙腈、乙酸乙酯、甲醇、三氯甲烷、甲苯（色谱纯， 美国Tedia公司）。石墨化碳黑SPE柱（ENVICarb/PSA PE，0.5 g， 6 mL，美国SigmaAldrich公司）。 　　2.2 标准溶液的配制 　　分别称取三唑酮等农药标准品（纯度99.5%）各10～20 mg， 溶于乙腈并定容至 100 mL，配制成100～200 mg/L标准储备液。混合标准中间液以单标储备液稀释配制而成，浓度为1.0 mg/L， 混合标准工作液（0.2， 0.1， 0.05， 0.02， 0.01， 0.005和0.001 mg/L）由混合标准中间液用乙腈逐级稀释而成。 　　2.3 实验方法 　　色谱柱为Waters C18柱（100 mm × 2.1 mm， 3.5 μm）；柱温：40 ℃；流速：200 μL/min；进样量：10 μL；流动相：乙腈（A），10 mmol/L乙酸铵溶液（B）；梯度：0～5 min，10%～30% A；5～15 min，30%～50% A；15～25 min，50%～95% A；25～25.1 min，95%～10% A；25.1～35 min，10% A。 　　电喷雾电压：5500 V；雾化气压力： 4.14 MPa；气帘气压力：1.38 MPa；辅助气流速：4.14×103； 离子源温度：450 ℃；正离子多反应监测；碰撞气：Medium；，定性离子对和定量离子对的去簇电压（Declustering potential，DP）