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第二章 微生物细胞与分裂 第一节 微生物的细胞结构与功能 原核细胞:无核膜,只有裸露DNA,无有丝分裂,缺少细胞器。 缺壁细菌 原生质体:G+菌经溶菌酶或青霉素处理; 球状体:G-菌,残留部分细胞壁。 是研究遗传规律和进行原生质体育种的良好实验材料。 L型细菌:自发突变形成细胞壁缺陷菌株; 酵母菌的细胞壁 主要成分有葡聚糖、甘露聚糖蛋白质、几丁质。 霉菌的细胞壁:主要成分是纤维素、几丁质、葡聚糖等 。 藻类的细胞壁:主要成分有纤维素构成结构骨架。 二、细胞核 细胞核是微生物储存遗传信息的主要场所,并在细胞中执行诸如复制、重组、转录、翻译以及对细胞结构及其活动进行调节和控制。 原核微生物的核质体:又称原核、拟核、核区或核基因组。 真核微生物的细胞核:由核膜、核仁、染色质和核质等组成。 三、质粒 plasmids 1 定义: 质粒(plasmid):一种独立于染色体外,能进行自主复制的细胞质遗传因子,主要存在于各种微生物细胞中。 质粒所含的基因对宿主细胞一般是非必需的; 在某些特殊条件下,质粒有时能赋予宿主细胞以特殊的机能,从而使宿主得到生长优势。 第三节 微生物的生活史 生活史:指生物在生长发育一个循环周期中的一系列变化。其中主要指生物的二倍体和单倍体的交替生存的改变。 高等生物只有有性生殖;低等生物则通过有性生殖、无性生殖或准性生殖来繁殖后代。 一、不同生物的生活史特点 (1)多细胞的高等生物:为二倍体生物,通过减数分裂产生两性生殖细胞,即精、卵细胞;两性细胞融和,形成二倍体的受精卵,通过有丝分裂产生许多二倍体的体细胞。 (2)真核微生物:多数为单倍体,体细胞结合形成的二倍体细胞通过减数分裂产生单倍体的有性孢子,有性孢子萌发后产生单倍的营养体。 ① 酵母菌 ② 霉菌 生活周期包括无性繁殖、有性繁殖或准性繁殖。真菌主要无性繁殖,半知菌准性繁殖。 准性繁殖:两个体细胞内的核融合,及同源染色体的交换,直至基因重组,完成了和有性繁殖相似的繁殖过程。 准性生殖过程中产生的异核体,杂合二倍体及重组体的频率极低,通过紫外线、樟脑蒸汽等处理可以诱发提高核融和频率。 用γ射线、紫外线、氮芥等处理杂合二倍体,可以提高单倍体杂合子的频率。 第二章 思考题 革兰氏阳性和阴性菌的细胞壁结构有何差异?它们对溶菌酶和青霉素的敏感有何不同? 缺壁细菌有哪些类型和异同?制备缺壁细菌主要有哪些途径? 原生质体制备时,为什么不同微生物要选择不同的酶?举例说明。 无性孢子 有性孢子 半知菌的准性繁殖 * * 真核细胞:有核膜,能进行有丝分裂,具细胞器。 利用16SrRNA建立分子进化树的美国科学家 Carl Woese 三域学说的建立 Woese在1977年根据16SrRNA核苷酸序列同源性,提出三域系统:古细菌、真细菌、真核生物。 (1)古细菌原界(Archaebacteria ,包括产甲烷细菌、极端嗜盐菌和嗜热嗜酸菌; (2)真细菌原界(Eubacteria ,包括蓝细菌和各种除古细菌以外的其它原核生物; (3)真核生物原界(Eucaryotes),包括原生生物、真菌、动物和植物。 一、细胞壁(cell wall) 是细胞质膜外面具有一定硬度和韧性的一层壁套,使细胞保持一定形状,保障其在不同渗透压条件下生长,即使在不良环境中也能防止胞溶作用。 Prokaryotic Cell Bacillus megaterium 1、革兰氏阳性细菌的细胞壁成分 G+菌细胞壁化学组成以肽聚糖 peptidoglycan 为主。这是原核微生物所特有的成份,占细胞壁物质总量的40-90%。 青霉素作用点 溶菌酶作用点 N-乙酰葡糖胺 N-乙酰胞壁酸 2、革兰氏阴性细菌的细胞壁成分 G-细胞壁的组成和结构比G+更复杂。主要成份为:脂多糖、磷脂、脂蛋白、肽聚糖。 G-有肽聚糖,仅占细胞壁干重的5-10%。肽聚糖结构与G+相同,但短肽尾中的3号位上L-Lys往往被其他二氨酸取代. G+ 与G-菌细胞壁成分及结构区别 2、结构特点 通常以共价闭合环状超螺旋双链DNA分子存在 具有自我复制能力; 3 质粒基因不是生长所必需,但决定宿主细胞的某些特性; 4 具有不相容性; 5 可自行或以人工方法消除 3、质粒在基因工程中的应用 质粒的优点: (1)体积小,易分离和操作 (2)环状,稳定 (3)独立复制 (4)拷贝数多 (5)存在标记位点,易筛选 E. coli的pBR322质粒是一个常用的克隆载体 营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在 营养体只能以单倍体形式存在 营养体只能以二倍体存在 A、营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在 S.cerevisiae 酿酒酵母 的生
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