Chapter8亲和纯化解答.pptVIP

第八章 亲和色谱 生物亲和作用（bioaffinity） 定义： 　生物分子能够区分结构和性质非常相近的其他分子，选择性地与其中某一分子相结合，生物分子间的这种特异性相互作用称为生物亲和作用或简称亲和作用。 通过亲和作用发生的结合称特异性结合（specific binding）或亲和结合（affinity binding）。 亲和纯化技术 定义：利用生物分子间的特异性结合作用（亲和作用）的原理进行生物物质分离纯化的技术。 分类：亲和色谱技术、亲和膜分离技术、亲和沉淀、亲和反胶团、亲和电泳等。 第一节 生物亲和作用 一、亲和作用的本质 参与亲和作用的两个分子中，其中之一为蛋白质的情况占绝大多数，或者两者均为蛋白质。 蛋白质参与亲和作用的机理 一般认为蛋白质的立体结构中存在结合位点，呈凹陷或凸起结构。 具有亲和作用的分子间还需分子或原子水平的各种相互作用，主要包括静电作用、氢键力、疏水性相互作用、配位键、弱共价键等。 生物亲和作用是一种复杂的生物现象，这也是亲和作用特异性高的主要原因。 二、影响亲和作用的因素 1.离子强度(I↑，氢键力↓，亲和作用↓ ； I↑，疏水性相互作用↑，亲和作用↑ ） 2.pH（根据蛋白质解离基团的pKa值而定,如解离基团为羧基，pH应高于其pKa值，带电量最高，静电作用力大， pH严重影响亲和作用，存在最佳pH，使亲和作用最大 ） 3.抑制氢键形成的物