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第七章 微生物的遗传变异和育种 遗传和变异是生物体最本质的属性之一。在遗传性适宜的环境条件下时,通过代谢和发育才能使其后代转化为与亲代相同的具体性状。对微生物遗传变异规律的深入研究,不仅促进了现代生物学的发展,而且还为微生物育种工作提供了丰富的理论基础。 第一节 微生物的遗传与变异概述 指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。变化后的新性状是稳定的、可遗传的。 例如,粘质沙雷氏菌,在25℃下培养时,会产生一种深红色的灵杆菌素,把菌落染成似鲜血那样。可是,当培养在37℃下时,群体中所有细胞都不产色素。如果重新降温至25℃,产色素能力又得到恢复。只有遗传型的改变,即生物体遗传物质结构上发生的变化,才称为变异。 第二节 遗传变异的物质基础 (一)、核酸--遗传变异的物质基础 (3个经典实验) 1、经典转化实验 Griffith是第一个发现转化现象的 ,虽然当时还不知道称之为转化因子的本质是什么,但是他的工作为后来Avery等人进一步揭示转化因子的实质,确立DNA为遗传物质奠定了重要基础。 2、噬菌体感染实验 1952年,Hershey和Chase证实了DNA是噬菌体的遗传物质基础的著名实验。 3、植物病毒重建实验 1956年Fraenkel-Conrat等用含RNA的烟草花叶病毒进行了病毒重建实验,证实了RNA是遗传物质。 第二节 基因突变和诱变育种 一、 基因突变 二、突变与育种 一、 基因突变(突变) 是变异的一类。凡指细胞内或病毒粒内遗传物质的分子结构突然发生的可遗传的变化。可自发或诱导产生。 狭义的突变:专指基因突变(点突变)。 广义的突变:包括基因突变和染色体突变。 突变的几率:很低——10-6 ~ 10-9。 野生型菌株(wild type strain,野生型):从自然界分离到的、没有发生过突变的菌株。 突变株(mutant,突变体、突变型):野生型经突变后形成的带有新性状的菌株。 (二) 基因突变的特点 1. 自发性:可自发地发生突变。 2. 不对应性:突变性状与引起的原因间无直接对应关系。 3. 稀有性:通常自发突变的频率在10-6 ~ 10-9间。 4.独立性:某基因的突变率不受他种基因突变率的影响。 5.可诱变性:自发突变的频率可因诱变剂的影响而大为提高(10 ~105倍)。 6.稳定性:基因突变后的新遗传性状是稳定的。 7.可逆性:野生型菌株某一性状可发生正向突变,也可发生相反的回复突变。 1、诱发突变(诱变) 指通过人为的方法,利用物理、化学或生物因素显著提高基因自发突变频率的手段。 诱变剂:凡具有诱变效应的任何因素。 诱变剂的种类很多,有物理因素(UV、激光、离子束、X射线、γ射线、快中子)和化学因素(亚硝酸、氮芥、烷化剂、碱基类似物、吖啶类化合物)。 2. 自发突变 指生物体在无人工干预下自然发生的低频率突变。 引起自发突变的原因: (1) 由背景辐射和环境因素引起; (2) 由微生物自身有害代谢产物引起; (3) 由DNA复制过程中碱基配对错误引起。 ★自发突变频率约为10-6。 对细菌作一般液体培养时, 因细胞浓度可达108/mL, 常会在其中产生自发突变 菌株。 (四) 紫外线对DNA的损伤及其修复 已知的DNA损伤类型很多,机体对其修复方法各异。 1. 紫外线对DNA的损伤 DNA中嘧啶对UV的敏感性较强,经UV照射后相邻嘧啶会形成嘧啶二聚体(TT,TC,CC)和水合物。形成二聚体后,造成局部DNA分子无法配对,从而引起微生物的死亡或突变。 2. 微生物修复受损DNA的作用 (1) 光复活作用 把经UV照射后的微生物立即暴露于可见光下, 就可出现明显降低其死亡率的现象。 对照:8×106个/ml E.coli 100个/ml E.coli 实验:8×106个/ml E.coli 2×106个/ml E.coli 光复活作用机制: 经UV照射后带有嘧啶二聚体的DNA分子,在黑暗下会被一种光激活酶(光解酶、光裂合酶)结合。 这种复合物在300 ~ 500 nm可见光下时,此酶会因获得光能而激活,并使二聚体分解成单体。 同时光解酶也会从复合物中释放出来,以便从新执行功能。 (2)切除修复(暗修复) 是活细胞内一种不依赖可见光就可对被紫外线等诱变剂损伤后的DNA进行修复的方式。 作用机制: 通过酶切作用去除 嘧啶二聚体,随后重 新合成一段正常DNA 链的核酸。在整个修 复过程中
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