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人LTF基因真核表达载体的构建 　　【摘 要】LTF基因表达产物乳铁蛋白为一种多功能糖蛋白，其具有调节免疫，抗炎、抗微生物、抗肿瘤等多种生物学功能。LTF在鼻咽癌中表达下调，但其在鼻咽癌中的功能尚未完全明确。为探讨LTF与鼻咽癌的关系，本研究以人cDNA为模板， PCR扩增LTF全长开放读码框，再将其定向插入真核表达载体， 测序鉴定序列和插入方向正确。LTF真核表达载体成功构建，为进一步探索LTF基因在鼻咽癌细胞内的功能奠定基础。 　　【关键词】真核表达载体；LTF；载体构建 　　乳铁蛋白（Lactoferrin， LTF） 是一种铁结合性糖蛋白，具有广泛的生物学活性。它不仅参与体内铁的转运及代谢、机体免疫调节，还具有抗炎症、抗微生物及抗肿瘤等活性。 　　鼻咽癌的发生是多因素、多阶段、多步骤的过程，遗传因素是其发生的重要因素之一。研究显示，LTF在慢性鼻咽炎中表达正常，在鼻咽癌中表达下调[1]，提示LTF可能是鼻咽癌候选抑瘤基因。本实验构建了LTF 基因真核表达载体为进一步进行LTF 基因体内外功能研究奠定了基础。 　　一、材料和方法 　　（一）菌株和载体 　　E.Coli DH5α菌株；pMD18-T载体 （Takara）是一种高效克隆PCR产物（专用载体，有 Ampr 抗性；pcDNA3.1（-）载体（Invitrogen）含CMV启动子，具有Ampr和Neor抗