自身抗体的检测及应用分析.ppt

自身抗体的检测及应用 一、自身免疫 【概念】 当机体免疫系统受某种因素作用使自身免疫 耐受削弱或破坏时，免疫系统会对自身成份包括 正常或变性的组织、器官、细胞、蛋白质或酶类 等自身抗原产生免疫应答反应，出现自身抗体或 致敏淋巴细胞的这种现象称为自身免疫 。 一、自身免疫 自身免疫可以是正常生理性的，例如： 针对衰老或死亡的自体细胞。 自身免疫也可以是病理性的，引起自身免疫病。 二、自身免疫性疾病 【概念】 在内因与外因的共同作用下，机体的自身免 疫应答失控，反应过度，直接或间接破坏自身组 织，并引起相应器官病变，导致临床症状，则为 自身免疫性疾病 。 分为器官特异性和全身性。 二、自身免疫性疾病 自身免疫性疾病的特点： （1）多数自身免疫性疾病是自发或特发性的，感染，药物等外因可能有一定的影响。 （2）患者血清中存在有高水平的γ－球蛋白。 （3）患者血清中有高效价的自身抗体或出现与自身抗原反应的致敏淋巴细胞。 （4）病损部位有变性的免疫球蛋白沉积，呈现以大量淋巴细胞和浆细胞浸润为主的慢性炎症。 二、自身免疫性疾病 自身免疫性疾病的特点： （5）病程一般较长，发作与缓解交替出现，仅有少数为自限性。 （6）女性多男性，老年多于青少年。 （7）有遗传倾向。 （8）应用肾上腺皮质激素等免疫抑制剂有效。 （9）常有其它自身免疫病同时存在。 （10）可复制出相似的动物疾病模型 。 三、自身抗体 【概念】 由各种原因造成的机体B细胞产生针 对自身组织成分的抗体，称为自身抗体。 自身抗体是自身免疫性疾病的重要标志，每 种自身免疫性疾病都伴有特征性的自身抗体谱。 RA自身抗体谱及临床意义 RF 60％RA中出现，量与RA活 动性及严重性呈正相关。 亦在其它CTD出现 抗CCP 在50％RA中出现 （抗环瓜氨酸肽抗体） 特异性较高 AKA（抗角蛋白抗体） 在40％RA阳性 APF（抗核周因子） 在52％RA阳性 抗RA33 RA阳性率为35％ 抗Sa 在部分RA阳性 自身抗体与疾病的关系 某些自身抗体对某种疾病的诊断具有高度特 异性，已经成为该病的血清标记抗体或特异性抗 体 。 某些自身抗体与疾病的活动性有相关性，少数自身抗体参与了免疫病病理性损伤 。 特异性较强的自身抗体 抗Sm 系统性红斑狼疮 抗Scl-70 系统性硬化症 抗SSA/SSB 干燥综合征 抗CCP 类风湿关节炎 抗体滴度的高低可判断疾病的活动性 抗双链DNA SLE aCL SLE、磷脂抗体综合征 RF 类风湿关节炎 预测疾病的预后及临床亚型 抗Jo-1 皮肌炎合并肺间质病变 抗Scl-70 弥漫性系统性硬化 抗rRNP 狼疮脑病 自身抗体的意义 自身免疫性疾病的诊断； 疾病活动性的判断； 疗效的观察及预后； 指导临床用药等； 进行不同疾病的鉴别诊断。 自身抗体常用检测方法 自身抗体的检测方法： （1）酶联免疫吸附测定法（ELISA）：该法检测自身抗体快速、敏感及特异性高，但对抗原的要求很高，必须使用高质量的纯化抗原，由于一种抗原只能检测一种抗体，多种抗体的检测就必须多种单独的抗原，因此该法在临床免疫实验室的应用受到一定限制 。 （2）酶免疫斑点 条带 实验 【优点】将经亲和层析纯化的抗原包被在固定的位置，每一种抗原只对应一条条带，不会产生非特异性反应条带，结果灵敏度高、特异好，判断实验结果简单，每个反应区均有质控带，可以显示操作是正确，阴性与阳性的结果明显，容易判断，条带显色与抗体滴度相关 。 3 间接免疫荧光法 IFT : 检测ANA的金标准， 具有很高的敏感性和特异性。 间接免疫荧光法原理 将稀释的血清与生物载片（反应区内固定有包被基质的生物薄片）温育，如果样本是阳性的，特异性IgG、IgA和 IgM抗体与相应的核抗原结合。在第二次温育时，荧光素标记的抗人抗体与结合在生物基质上的抗体反应，形成荧光显微镜下所观察到的特异性荧光模式。 抗核抗体 ANA 是以自身真核细胞成分作为 靶抗原的一组自身抗体的总称，泛指各种核 成分的抗体，是一种广泛存在的自身抗体。 抗核抗体 ANA 抗核抗体 ANA 斑点型 与抗ENA有关，应进一步查特异性抗体 ds-DNA 判断疾病活动性---ELISA 诊断疾病-----IFT 指标阴性是否意味着疾病的排除？ 指标阳性意味着什么？ 特异性的局限 各指标与对应疾病之间： 如 SLE 抗Sm抗体特异性99% 敏感性仅为25% RA RF阳性可出现在SLE, pSS, SSc, 慢性肺结核，高球蛋白血症等，5%正常人可出现低滴度的RF 。 “自相矛盾”的结果 ANA 间接免疫荧光法 阳性，靶抗原阴性 ANA