微生物学.重点.ppt

1.延滞期(lag phase) 将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零。也称延迟期、适应期、停滞期、调整期。 延滞期的特点：生长速率常数为0；细胞变大或增长； RNA含量增高，原生质呈嗜碱性； 分裂迟缓、合成代谢活跃； 对外界不良条件敏感 出现原因： 缺乏分解或催化底物的酶或辅酶 缺乏充足的中间代谢物 ?在实验室中，为了培养严格厌氧菌，除应驱走空气中的氧外，还应在培养基中加入适量的还原剂，包括巯基乙酸、抗坏血酸（Vc）、硫化钠、半胱氨酸、铁屑、谷胱甘肽或疱肉（瘦牛肉粒）等，以降低它的氧化还原势。例如加入有铁屑的培养基，其Eh值可降至-0.40V的低水平。 ?测定氧化还原势值除用电位计外，还可使用化学指示剂，例如刃天青等。刃天青在无氧条件下呈无色（Eh相当于-40mV）；在有氧条件下，其颜色与溶液的pH值相关，一般在中性时呈紫色，碱性时呈蓝色，酸性时为红色；在微含氧溶液中，则呈现粉红色。 4 经济节约： 配制培养基时应尽量利用廉价且易于获得的原料作为培养基成份, 特别是在发酵工业中,以降低生产成本。 （1）以粗代精：糖蜜取代蔗糖。对微生物来说，各种粗原料营养更加完全，效果更好，而且在经济上也节约。 （2）以野代家：以野生植物原料代替栽培植物原料，如木薯、橡子、薯芋等都是富含淀粉质的野生植物，可以部分取代粮食用于工业发酵的碳源。 （3）以废代好：以工农业生产中易污染环境的废弃物作为培养微生物的原料。 例如，糖蜜(制糖工业中含有蔗糖的废液)、乳清(乳制品工业中含有乳糖的废液)、豆制品工业废液及黑废液(造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸纸浆)等都可作为培养基的原料。工业上的甲烷发酵主要利用废水、废渣作原料, 在我国农村，已推广利用粪便及禾草为原料发酵生产甲烷作为燃料。另外,大量的农副产品或制品，如麸皮、米糠、玉米浆、酵母浸膏、酒糟、豆饼、花生饼、蛋白胨等都是常用的发酵工业原料。 （4）以简代繁：“减法”；某制药厂改进链霉素发酵液中的原有配方，设法减去30-50%的黄豆饼粉、25%的葡萄糖和20%硫酸铵，结果反而提高了产量。 （5）以氮代朊：氨基酸自养微生物；以大气氮、铵盐、硝酸盐或尿素等一类非蛋白质或非氨基酸廉价原料用作发酵培养基的原料，让微生物转化成菌体蛋白质或含氮的发酵产物供人们利用。 （6）以纤代糖：以纤维素代替淀粉或糖类原料。开发利用纤维素这种世界上含量最丰富的可再生资源。将大量的 纤维素农副产品转变为优质饲料、工业发酵原料、燃料及人类的 食品及饮料。 （7）以烃代粮： “石油微生物”（28属细菌、12属酵母菌、30属丝状真菌）利用石油或天然气生产一些不易用粮食原料生产的特殊化工原料（高级醇、脂肪酸和环烷酸等）以及副产品—SCP；以石油或天然气副产品代替糖质原料来培养微生物。生产石油蛋白将石油产品转化成一些产值更高的高级醇、脂肪酸、环烷酸等化工产品和若干合成物；对石油产品的品质进行改良，如脱硫、脱蜡等。 （8）以“国”代“进”：用廉价的棉子饼或花生饼粉代替玉米浆，以白玉米粉代替乳糖等富有中国特色的培养基配方，推动了青霉素发酵工业的快速发展。 （二）4种方法 1 生态模拟：肉汤、鱼汁（细）；果汁（酵）；润湿的麸皮、米糠（霉）；肥沃土壤（放）；玉米芯（脉胞菌）；米饭、面包（根） 2 参阅文献 3 精心设计：借助于优选法或正交试验设计等行之有效的数学工具 4 试验比较：在上述3项工作基础上。试验的规模一般都遵循由定性到定量，由小到大，由实验室到工厂等逐步扩大的原则。 例如，可先在培养皿琼脂平板上（生长谱试验）测试某微生物的营养要求，然后做摇瓶培养或台式发酵罐培养试验，最后才扩大到试验型并进一步放大到生产型发酵罐中进行实验。 二 培养基的种类 （一）按对培养基成分的了解作分类 1 天然培养基 指一类利用动植物或微生物体包括用其提取物制成的培养基，这是一类营养成分复杂又丰富，难以说出其确切化学组成的培养基。 例如培养多种细菌所用的牛肉膏蛋白胨培养基，培养酵母菌的麦芽汁培养基等。 2 组合培养基 又称合成培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。 培养E. coli等细菌用的葡萄糖铵盐培养基，培养Streptomyces spp（一些链霉菌）的淀粉硝酸盐培养基（常称“高氏一号培养基”），培养真菌的蔗糖硝酸盐培养基（即察氏培养基）等。 3 半组合培养基 又称半合成培养基，指一类主要以化学试剂配制，同时