2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体LGL解说.pptVIP

三、动物细胞融合 指用自然或人工方法、使两个或多个不同的细胞融合成一个细胞的过程，又称为细胞杂交 杂交细胞：融合后形成的具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。 细胞融合方法 化学：PEG（聚乙二醇） 物理：电融合 生物：灭活的病毒（仙台病毒） * * * 二、动物细胞融合 细胞核 病毒颗粒 细胞核 灭活的病毒颗粒黏附在细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿过 细胞膜连接 二、动物细胞融合 细胞融合，形成杂种细胞 仙台病毒 紫外线 丧失感染性 （不感染细胞） 保留融合活性 （诱导细胞融合） 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 四、单克隆抗体 读下面一段文字资料，思考以下问题： 长期以来，为了获得抗体，采用的是把某种抗原反复注射到动物体内，然后从动物血清中分离出所需抗体的方法。用这种方法获得的抗体，不仅产量低，而且抗体的特异性差，纯度低，反应不够灵敏。人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。 什么是抗体？ 由何种细胞产生？ 主要分布在哪里？ 起何作用？ 什么是单 克隆抗体？ 效应B细胞 血清 特异性免疫作用 抗体：机体受抗原刺激后产生的，并且能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 用单个B淋巴细胞进行无性增殖（扩增），也就是通过克隆，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的抗体 ——单克隆抗体 ????????????????????????????????????????????????????????? ．? 克隆（clone）：亦称无性繁殖系或简称无性系。 克隆（clone）：亦称无性繁殖系或简称无性系。 克隆（clone）：亦称无性繁殖系或简称无性系。 单克隆抗 体 讨论：怎样才能获得单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 设计方案： 一个B淋巴细胞——只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞——能无限增殖 ——化学性质单一、特异性强的抗体。 杂种细胞 单克隆抗 体 抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 细胞融合、筛选 细胞培养 筛选 提 取 体外培养 体内培养 克隆（clone）：亦称无性繁殖系或简称无性系。 单克隆抗体制备过程 单克隆抗体制备过程 3.本过程利用了哪些原理？ 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 2.两次筛选分别有什么目的？ 1.为什么选用小鼠骨髓瘤细胞与B细胞融合？ 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比，单克隆抗体产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显。 应用主要有： 1、临床诊断 2、作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”治疗肿瘤 下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案 3、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。 1、该实验方案的目的是__________ 2、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______ 4、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段。 制备单克隆抗体 B细胞 抗体 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞 分泌抗体 无限增殖 原代 传代 B 体外培养 骨髓瘤细胞 杂交瘤细胞 足够数量的细胞群 注射到 小鼠腹腔 A C 练一练 A 、 B细胞为动物细胞,请据图回答问题: A细胞 B细胞 C细胞 D细胞 (1)若A细胞为骨髓瘤细胞B细胞为淋巴细胞,那么D细胞称为 细胞,D细胞具有两个亲本细胞的特征,一方面因具有骨髓瘤细胞的 性质,通过 方式产生大量细胞,我们称之为 过程;另一方面能分泌大量的抗体,我们把该过程分泌的抗体称