岛津SPD-15C高效液相色谱的使用剖析.ppt

注意事项 四.注意事项 8.如发现泵漏液、压力不正常等较严重的情况，应请有经验的维修人员进行检查，必要时联系专业技术人员进行维修。仪器严禁带“病”工作。 By 孙毅 THANK YOU By 孙毅 高效液相色谱的使用 岛津SPD-15C 使用方法 By 孙毅 一.操作准备 二.仪器组成 三.操作过程 四.注意事项 目录 By 孙毅 1.1流动相的配制 一.操作准备 By 孙毅 用高纯度的试剂配制流动相，必要时照紫外分光光度法进行溶剂检查，应符合要求；水为新鲜制备的高纯水，可用超级纯水器制得或用重蒸馏水。对规定pH值的流动相，应使用精密pH计进行调节。配制好的流动相应通过0.45μm适宜的滤膜滤过，用前脱气。应配制足量的流动相及时待用。 一.操作准备 1.2样品溶液的配制 样品用规定溶剂配制成供试溶液。供试溶液在注入色谱仪前，一般应经0.45μm或适宜的滤膜滤过。必要时，在配制供试溶液前，样品需经提取净化，以免对色谱系统产生污染。? By 孙毅 一.操作准备 1.3检查仪器状态 检查色谱柱是否适用于本次试验，色谱柱进出口 位置是否与流动相的流向一致，原保存溶剂与现用流动相能否互溶，流动相的pH值与该色谱柱是否相适应，仪器是否完好，仪器的各开关位置是否处于关断的位置。 By 孙毅 LC-15C液相色谱泵、 SPD-15C紫外-可见检测器、LCsolution?15c色谱工作站。? 仪器组成 二.仪器组成 By 孙毅 3.1接通电源 三.操作过程 将各仪器电源插头插入插座内，按power键打开泵和检测器电源，打开泵（该仪器除梯度外可用单泵也可同时用双泵，用单泵可仅开一个泵，用双泵需两个泵同时打开，双泵操作与单泵操作基本一致）。 By 孙毅 3.2泵的操作 三.操作过程 打开泵和检测器电源，仪器由红灯转换为绿灯，更换所需的流动相，然后将 排液阀旋钮逆时针旋转180°以打开排液阀。 ?按“purge”键运行，开始冲洗。如果排液阀旋钮旋转的度数超过180°，任 何排出的流动相都可能包含气泡。这是正常现象。? By 孙毅 3.2泵的操作 三.操作过程 等绿灯不再闪烁时代表清洗完成，以顺时针方向尽量旋转排液阀旋钮，关闭排液阀。按“pump”键，开始泵的运行。? By 孙毅 3.3工作站的使用 三.操作过程 双击桌面Lcsolution?15c】图标，确认已经开启LC系统后，启动【LC实时 分析”工作站。启动【LC实时分析】工作站后，确保分析仪器的所有单元（泵、柱温箱和检测器）都已连至系统控制器。确保所有单元上都没有显示任何错误消息。 By 孙毅 3.3工作站的使用 三.操作过程 设置系统配置，以便该系统与仪器的实际配置相匹配。仅当第一次将LCsolution?15c连接到分析仪器，或仪器的配置发生变化时，才需要下列设置。如果仪器的配置没有任何变化，点击“视图”里的助手栏，点系统配置用单泵或双泵进行运行。 By 孙毅 3.4仪器参数设置 三.操作过程 点【文件】项下【新建方法文件】，单击“仪器参数视图”下【正常】选项，可以在其中输入分析条件，例如LC停止时间、泵A流速、检测器A波长通道?等。确保为每一检测器设置了【LC停止时间】【结束时间】。?【LC停止时间】是控制仪器的持续时间。如果时间程序或馏分收集时间程序都没有设置，则将其保留为0.01min。 By 孙毅 3.4仪器参数设置 三.操作过程 如用单泵运行，泵【模式】钩选“等浓度洗脱”（双泵运行勾选“二元高压梯度洗脱”），点【高级】选项卡中“泵”选项，设置泵A流速（一般为1.000ml/min）和压力限制最大值、最小值。如需双泵（如梯度洗脱等），点【LC时间程序】设置梯度洗脱表，单击“下 载”将设置传输到仪器，使用新名称保存方法文件。 By 孙毅 3.4.1进样设置 三.操作过程 确保显示【就绪】，且【色谱图视图】中的基线稳定后（一般约需15～30分钟）。单击【LC实时分析】窗口助手栏上的“单次运行”图标，出现“单次运行”屏幕，设置样品名、样品ID、数据文件、数据描述、进样体积等，然后单击【确定】。 By 孙毅 3.4.2检测器调零 三.操作过程 检测器调零：点击“检测器A零点”图标，使检测器数值调零。 By 孙毅 3.5进样 三.操作过程 吸取不少于20μl的样品，放在进样口，向左打开进样阀，将样品全部打入进样口，再向右打下进样阀，系统即自动开始采集数据。单次分析开始，并且【LC实时分析】窗口中的状态从【就绪】变为【运行】。 By 孙毅 3.5进样 三.操作过程 当达到【仪器参数视图】中指定的检测器的【结束时间】时，自动终止数据采集。如设定的【结束时间】要修改，可以单击【采集】助手栏中的【停止】图标，也可以在【数据采集】菜单的【更改分析时间】项目中，在数据采集过程更改结束时间。一旦开始数据