2.2.2_(公开课)动物细胞融合与单克隆抗体教案.pptVIP

1 若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的 细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。 （2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。 3 假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成 种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是 ，其特点是_________________________________________。 效应B 抗原 细胞融合 聚乙二醇 灭活的病毒 　选择性 　 3 既能无限增殖又能产生特异性抗体 杂交瘤细胞 4 在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。 （5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。 特异性强、灵敏度高 有丝 无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境 15、（1）单克隆抗体是指 。 （2）制备单克隆抗体的步骤： ①将__________注入小鼠体内，从小鼠脾脏中获得淋巴细胞，其中至少1个淋巴细胞带有抗该抗原的抗体。 ②将步骤①获得的B淋巴细胞与步骤②培养的骨髓瘤细胞在_________________的诱导下融合。 ③将诱导后产生的多种细胞，放在_______培养基的多孔培养板上培养，筛选。 ④这样获得的杂交瘤细胞既具有B淋巴细胞_____________的能力，又具有________________的本领。 ⑤检测和分离带有抗X抗体的阳性细胞，培养板中每孔放一个细胞进行培养。 ⑥将阳性细胞进行增殖，从而制备出大量抗该抗原的单克隆抗体。 化学性质单一，特异性强的抗体 抗原 聚乙二醇 选择性 无限增殖 产生专一抗体 （3）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种： ①体外培养法，可获得10μg/mL的抗体；②动物体内诱生法可获得5~20mg/mL的抗体。你选择的方法及原因是 。 （4）用本法制备出的单克隆抗体仍具有局限性，因为它是用小鼠的_______细胞制备的，其化学本质是___________，应用于人体，会作为 产生 ，解决这个问题的方法是_____________________________。 大量生产选①，小规模生产选② 效应B 蛋白质 异物 免疫反应 采用人的效应B细胞制备 15、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：　　（1）该方案能达到预期效果吗？　　　。原因是 ______________________________________________。　　（2）图中②为 过程，常用 作为诱导剂。该细胞继承了_____________________ ，因此不仅能分泌　　___________，还有 本领。 不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生专一抗体的B淋巴细胞 细胞融合 灭活病毒 双亲细胞的遗传物质 特异性抗体 大量增殖 制备单克隆抗体 （3）该方案的目的是_________________________。 3.过程： ①免疫动物 注射抗原的目的是什么？ 获得能产生相应抗体的B淋巴细胞（浆细胞） 诱导细胞融合常用方法是什么？ 灭活的仙台病毒 如何进行筛选？ 具有筛选作用的培养基（HAT培养基） ？种 BB 、B瘤 、 瘤瘤 、 杂交细胞 如何获得大量的单克隆抗体？ ②免疫B细胞和骨髓瘤细胞的制备 ③细胞融合 ④杂交瘤细胞的选择培养 ⑤杂交瘤细胞的筛选 ⑥分泌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立 ⑦单克隆抗体的大量制备 * 灭活的病毒被膜中有融合蛋白（fusion protein）,可介导病毒同宿主细胞融合,也可介导细胞与细胞的融合,因此可以用紫外线灭活的此类病毒诱导细胞融合 * 病毒通过以下不同的方式进入宿主细胞：注射式侵入、细胞内吞、膜融合以及其他特殊的侵入方式。　　注射式侵入：一般为有尾噬菌体的侵入方式。通过尾部收缩将衣壳内的DNA基因组注入宿主细胞内。　　细胞内吞：动物病毒的常见侵入方式。经细胞膜内陷形成吞噬泡，使病毒粒子进入细胞质中。　　膜融合：有包膜病毒侵入过程中病毒包膜与细胞膜融合。　　直接侵入：大致可分为三种类型　⑴部分病毒粒子直接侵入宿主细胞，其机理不明。　⑵病毒与细胞膜表面受体结合后，由细胞表面的酶类帮助病毒粒　　体释放核酸进入细胞质中，病毒衣壳仍然留在细胞膜外，将病毒侵入和脱壳融为一体。　⑶其他特殊方式。植物病毒通过存在于植物细胞壁上的小伤口或天然的外壁孔侵入，或植物细胞之间的胞