一)诱变剂种类的选择 1.诱变剂的种类? 2.选何种诱变剂? (没有定论,参考:菌株的特性,诱变史,或做实验确定) 诱变育种的操作方法 出发菌株 同步培养 细胞悬液 诱变处理 筛选变异菌株 四、诱变剂及诱变剂量 亚热带链霉菌(白霉素)与X射线剂量之间的变异关系 二)选择最适诱变剂量 五、影响突变率的因素 1 菌种遗传特性 (有的诱变剂只作用于DNA复制期,有的可作用于各期细胞) 2 菌体细胞壁结构 (有的菌种孢子壁厚、有保护层、均减弱诱变剂的作用效果) 3 培养条件和环境条件 ⑴前培养(诱变前预培养) 前培养一般加入咖啡因、蛋白胨、酵母膏、吖啶黄、b-重氮尿嘧啶、嘌呤等物质,能显著提高突变率。若加入氯霉素、胱氨酸等还原性物质,会使突变率下降。 ⑵后培养 后培养一般加入酪素水解物、酵母膏等富含氨基酸、生长因子、ATP等,有利于突变体重新调节代谢。 ⑶温度、pH、氧气等外界条件对诱变效应的影响 氮离子注入土霉素产生菌的诱变育种 内蒙赤峰药厂 单孢子悬浮液的制备:向培养好的斜面孢子瓶内加入10mL灭菌蒸馏水,刮下分生孢子,将孢子悬浮液移入装有灭菌玻璃珠的三角瓶内,振荡3 min后过滤。 处理前分生孢子的准备:取单孢子悬浮液0.1 mL,均匀涂布于直径90 mm的灭菌培养皿内,培养皿露置于净化工作台上,待无菌风将平板表面的水迹吹干后,加盖。 氮离子的注入:将上述制备好的含有分生孢子
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